PolymAb® monoclonal de coelho anti-P4HB para WB, IP, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P07237

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de P4HB (Proteína Dissulfeto-Isomerase)

• O gene P4HB codifica a proteína dissulfeto-isomerase (PDI), também conhecida como PDIA1, ERBA2L e outros apelidos. É uma enzima multifuncional pertencente à família das proteínas dissulfeto isomerases.
• A PDI catalisa a formação, quebra e rearranjo de ligações dissulfeto. Na superfície celular, atua como redutase que cliva as ligações dissulfeto das proteínas associadas, podendo modificar proteínas exofaciais. No interior da célula, garante a formação correta de ligações dissulfeto em proteínas nascentes.
• Em altas concentrações e após fosforilação pela FAM20C, a PDI atua como uma chaperona que inibe a agregação de proteínas mal dobradas. Por outro lado, em baixas concentrações, facilita a agregação (atividade antichaperona). Referências relacionadas: PMID:32149426
• A PDI é uma subunidade estrutural da prolil 4-hidroxilase e da proteína microsomal transferida de triacilglicerol MTTP, contribuindo para a síntese de colágeno e o metabolismo lipídico.
• Ela atua como receptor para LGALS9 em células T helper Th2: essa interação retém P4HB na superfície celular, aumenta a atividade dissulfeto redutase, altera o estado redox da membrana plasmática e promove a migração celular. Referências relacionadas: PMID:21670307
• A localização subcelular inclui o lúmen do retículo endoplasmático, melanossomos e membrana celular, refletindo seus papéis diversificados no dobramento de proteínas, secreção e regulação redox da superfície celular.
• As modificações pós-tradução incluem acetilação e fosforilação; ele contém um centro redox ativo com ligações dissulfeto e compartilha características estruturais como domínios semelhantes a tioredoxina.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 329–508 (região C-terminal) da P4HB humana, o que pode conferir especificidade para PDI e reduzir a reatividade cruzada com outros membros da família das dissulfeto isomerases.
• Para Western blot (WB), espera-se uma banda de aproximadamente 57 kDa. Valide o anticorpo no seu sistema de amostra específico, pois modificações pós-tradução podem causar pequenos desvios.
• Na imunoprecipitação (IP) e imunofluorescência (IF/ICC), a conformação nativa da proteína pode ser reconhecida; otimize as condições de lise e fixação para preservar os epítopos.
• Para imunohistoquímica (IHC-P), considere métodos apropriados de recuperação de antígeno, pois o epítopo está localizado em um domínio estruturado.
• O anticorpo tem reatividade cruzada relatada com P4HB de camundongo e rato, mas recomenda-se a validação na espécie/tecido desejado.

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