Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-p53 para WB, IP, ELISA - P04637

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do p53

• p53, também conhecido como Antígeno tumoral celular p53, Fosfoproteína p53 e Supressor tumoral p53, é codificado pelo gene TP53. Múltiplos isoformas existem (ex., isoforma 2 aumenta a atividade de transativação, isoforma 4 suprime a transativação, isoforma 7 inibe a apoptose) com propriedades funcionais distintas.
• Atua como um fator de transcrição multifuncional que induz parada do ciclo celular, reparo de DNA ou apoptose ao se ligar à sua sequência de DNA alvo, funcionando como um supressor tumoral em muitos tipos de tumor.
  Referências relacionadas: PMID:11025664, PMID:12524540, PMID:12810724
• A indução da apoptose é mediada em parte pela estimulação da expressão de BAX e antígeno FAS, ou pela repressão da expressão de Bcl‑2; sua atividade pró‑apoptótica é regulada por interações com proteínas da família ASPP.
  Referências relacionadas: PMID:12524540, PMID:17189187
• A localização subcelular inclui núcleo, citoplasma, mitocôndrias, retículo endoplasmático e centrossomo, permitindo um transporte dinâmico em resposta a sinais de estresse celular.
• Passa por extensas modificações pós‑traducionais incluindo fosforilação, acetilação, metilação e ubiquitinação, que modulam sua estabilidade e atividade transcricional.
• Regula o relógio circadiano reprimindo a ativação transcricional de PER2 mediada por CLOCK‑BMAL1.
  Referências relacionadas: PMID:24051492
• Expresso ubiquamente em tecidos normais com padrões dependentes de isoforma; por exemplo, a isoforma 2 está ausente no cérebro, pulmão e próstata, enquanto a isoforma 8 é detectada apenas no cólon, medula óssea, testículo, cérebro fetal e intestino.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno compreende uma proteína de fusão recombinante cobrindo os aminoácidos 1–393 do p53 humano (NP_000537.3), abrangendo quase a sequência de comprimento total; este projeto pode conferir reconhecimento de epítopos em múltiplos domínios funcionais, adequado para aplicações como Western blotting, imunoprecipitação e ELISA.
• Como um anticorpo monoclonal validado por KO, espera-se que exiba alta especificidade; considere usar um lisado de células com knockout de p53 como controle negativo em Western blotting para confirmar a identidade da banda alvo.
• Para Western blotting, o peso molecular previsto é 44 kDa, mas modificações pós‑traducionais e variações de isoforma podem resultar em múltiplas bandas ou um leve deslocamento; otimize as quantidades de carga e os tempos de exposição de acordo.
• Para imunoprecipitação, use protocolos padronizados e inclua um anticorpo controle de isotipo para avaliar a ligação inespecífica.
• Em ELISA, emparelhe este anticorpo com um anticorpo de detecção apropriado seguindo procedimentos padrão; valide na matriz de amostra relevante para garantir o desempenho.

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