Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-p53 (Validado por KO) para WB, IHC-P, IF/ICC - P02340

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do p53

• O antígeno tumoral celular p53 é um fator de transcrição multifuncional que regula a parada do ciclo celular, o reparo do DNA e a apoptose após danos ao DNA, atuando como um supressor tumoral crítico. Referências relacionadas: PMID:19556538, PMID:20673990, PMID:22726440
• O p53 medeia a apoptose por meio da ativação transcricional de BAX e FAS, ou da repressão de Bcl-2, e sua atividade pró-apoptótica é modulada pelas proteínas da família ASPP.
• Em resposta a danos no DNA, o p53 inibe a atividade da quinase CDK7 no complexo CAK, interrompendo a progressão do ciclo celular.
• O p53 localiza-se em vários compartimentos subcelulares, incluindo o núcleo, o citoplasma, os corpos de PML, o retículo endoplasmático e as mitocôndrias, refletindo seus diversos papéis funcionais.
• Modificações pós-traducionais, como acetilação, fosforilação e ubiquitinação, regulam a estabilidade e a atividade do p53.
• O p53 regula os ritmos circadianos ao reprimir a ativação transcricional de PER2 mediada por CLOCK-BMAL1. Referências relacionadas: PMID:24051492
• O p53 induz a transcrição do RNA longo intergênico não codificante p21 (lincRNA-p21), que participa da repressão transcricional e da apoptose dependentes de p53.
• Em cooperação com o PPIF mitocondrial, o p53 ativa a necrose induzida por estresse oxidativo de maneira independente da transcrição.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético, sugerindo que o anticorpo provavelmente reconhece um epítopo linear conservado entre humanos, camundongos e ratos. Ao utilizar o anticorpo em Western blot, considere otimizar as condições de detecção em condições redutoras e não redutoras.
• Para IHC-P, métodos de recuperação antigênica, como a recuperação de epítopos induzida por calor em tampão citrato, podem melhorar a coloração; valide o procedimento utilizando controles teciduais positivos e negativos apropriados.
• Em IF/ICC, os protocolos de fixação e permeabilização devem ser testados, pois o p53 pode estar presente tanto nos compartimentos nucleares quanto nos citoplasmáticos, dependendo do tipo celular e das condições de estresse.
• Para aplicações de IP e ELISA, confirme o desempenho do anticorpo utilizando lisados com expressão conhecida de p53 e proteína p53 recombinante.

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