Anti-p53 Rabbit PolymAb® (Validado por KO) para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P04637

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do p53

• p53 é um fator de transcrição multifuncional e supressor de tumores, induzindo parada do ciclo celular, reparo de DNA ou apoptose ao se ligar à sua sequência de DNA alvo (UniProt P04637). Referências relacionadas: PMID:11025664, PMID:12524540, PMID:12810724
• Atua como um supressor de tumores em muitos tipos de tumores, regulando negativamente a divisão celular controlando a expressão de genes necessários para este processo. Referências relacionadas: PMID:11025664, PMID:12524540, PMID:12810724
• A indução de apoptose por p53 é mediada através da estimulação da expressão do antígeno BAX e FAS, ou pela repressão da expressão de Bcl-2 (PubMed:12524540, PubMed:17189187). Referências relacionadas: PMID:12524540, PMID:17189187
• p53 localiza-se em múltiplos compartimentos subcelulares, incluindo o núcleo, citoplasma, nucleoplasma, corpos PML, retículo endoplasmático, matriz mitocondrial e centríolo.
• Múltiplas isoformas de p53 são expressas de maneira dependente do tecido; algumas isoformas aumentam ou suprimem a atividade de transativação da isoforma 1.
• Modificações pós-traducionais chave do p53 incluem acetilação, fosforilação, metilação e ubiquitinação (conjugação Ubl), conforme indicado pelas palavras-chave do UniProt.
• p53 também está envolvido na regulação do relógio circadiano reprimindo a ativação transcricional mediada por CLOCK-BMAL1 de PER2 (PubMed:24051492). Referências relacionadas: PMID:24051492

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio é uma proteína recombinante humana p53; isso pode sugerir que o anticorpo pode reconhecer tanto o p53 nativo quanto o desnaturado, mas a validação experimental é recomendada.
• Para Western blotting, espera-se uma banda em aproximadamente 44 kDa; use lisatos celulares positivos (por exemplo, HEK293, HeLa) e negativos (p53 knockout) apropriados para confirmar a especificidade.
• Em imuno-histoquímica (IHC-P) e imunofluorescência (IF/ICC), otimize as condições de recuperação de antígeno e permeabilização e inclua controles de isotipo.
• Aplicações de ELISA podem exigir revestimento com p53 recombinante ou lisatos celulares; valide o anticorpo no sistema de ensaio pretendido.
• O anticorpo é validado por KO; considere o uso de linhagens celulares ou tecidos KO como controles essenciais para garantir a especificidade do sinal.

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