Anticorpo monoclonal de coelho anti-PAF1 para WB, IHC-P, ELISA - Q8N7H5

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização do PAF1

• Componente central do complexo PAF1 (PAF1C), que regula o alongamento da transcrição pela RNA-polimerase II, as modificações de histonas e a formação da extremidade 3' do mRNA.
• O PAF1C associa-se ao CTD da RNA-polimerase II tanto em estados não fosforilados quanto fosforilados, facilitando o acoplamento entre a transcrição e os processos cotranscricionais.
• Promove a monoubiquitinação da histona H2B K120 (H2BK120ub1) por meio do recrutamento do complexo ubiquitina-ligase RNF20/40 e estimula a metilação de H3K4me3; essas modificações são essenciais para a transcrição ativa.
• É necessário para a transcrição dos genes-alvo Hox e Wnt e desempenha um papel na hematopoiese e na leucemogênese por meio de interações com oncoproteínas de fusão KMT2A/MLL1.
• Localiza-se no núcleo, em conformidade com suas funções de regulação transcricional.
• Apresenta atividade oncogênica e está implicado em vias de splicing alternativo, fosforilação e conjugação de ubiquitina.
• Durante a infecção pelo vírus influenza A (H3N2), interage com a proteína viral NS1 para modular a transcrição de genes do hospedeiro.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético da região N-terminal (aa 1-100) do PAF1 humano; portanto, o anticorpo pode detectar a proteína completa e determinadas isoformas. Verifique a especificidade para isoformas em seu sistema experimental.
• Para Western blot, espere uma banda próxima de 60 kDa em condições redutoras; inclua controles positivos, como lisados de células HeLa ou HEK293.
• A coloração por IHC-P deve mostrar localização nuclear; otimize a recuperação antigênica e a diluição do anticorpo utilizando controles de tecido positivo adequados.
• No ELISA, o imunógeno peptídico pode servir como padrão. A reatividade cruzada com o PAF1 de camundongo e rato permite a aplicação nessas espécies; confirme o desempenho nas amostras da espécie relevante.
• Considere ensaios de co-imunoprecipitação ou ChIP caso o anticorpo funcione na análise de complexos proteicos nativos, mas valide essas aplicações de forma independente.

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