Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-PAK2 para WB, IF/ICC, ELISA - Q13177

Especificações e Parâmetros Essenciais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PAK2

• A PAK2 (também conhecida como PAK65, PAKgamma, p58, PAK-2, S6/H4 kinase) é uma quinase de serina/treonina que atua como efetora a jusante das pequenas GTPases CDC42 e RAC1. Ela desempenha um papel central na regulação do citoesqueleto, motilidade celular, progressão do ciclo celular, apoptose e proliferação. Referências relacionadas: PMID:7744004, PMID:12853446, PMID:16617111, PMID:19273597

• A PAK2 de comprimento completo promove a sobrevivência e o crescimento celular, além de fosforilar JUN para mediar a proliferação induzida por EGF. Ela também fosforila MAPK4 e MAPK6, ativando MAPKAPK5 para regular a polimerização da F-actina e a migração celular. Referências relacionadas: PMID:7744004, PMID:21177766, PMID:21317288

• A PAK2 fosforila numerosos substratos, incluindo a histona H4, facilitando a montagem de nucleossomos de H3.3-H4, BAD, a proteína ribossômica S6 e a caspase-7 (CASP7), inibindo a atividade da CASP7. Referências relacionadas: PMID:21724829, PMID:21555521, PMID:27889207

• Além de sua atividade quinase, a PAK2 associa-se a ARHGEF7 e GIT1 para controlar a orientação do fuso durante a mitose de maneira independente da quinase. Referências relacionadas: PMID:19273597, PMID:19923322

• Sob estímulos apoptóticos, a PAK2 é clivada por caspases, gerando um fragmento ativo p34 (PAK-2p34) que se transloca para o núcleo e promove a apoptose mediada por JNK. A PAK2 ativada por caspase também fosforila MKNK1, reduzindo a tradução celular. Referências relacionadas: PMID:12853446, PMID:16617111, PMID:9171063, PMID:15234964

• A PAK2 localiza-se no citoplasma, no núcleo, na região perinuclear e na membrana. É expressa de forma ubíqua, com níveis mais elevados no músculo esquelético, ovário, timo e baço.

• As modificações pós-traducionais incluem acetilação, miristoilação e autofosforilação regulatória, todas modulando sua atividade e suas interações.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para Western blotting, detecte a PAK2 de comprimento completo em aproximadamente 58 kDa; em condições apoptóticas, pode aparecer um fragmento de 34 kDa clivado por caspase. Inclua controles positivos apropriados.
• Na imunofluorescência/ICC, espere uma marcação citoplasmática e nuclear, com possível enriquecimento perinuclear. Otimize a fixação e a permeabilização para cada tipo celular.
• Para ELISA, faça uma titulação utilizando o peptídeo imunógeno (aa 1–100) para confirmar a especificidade; a reatividade cruzada com camundongo e rato sugere ampla utilidade em mamíferos.
• Ao utilizar amostras de camundongo ou rato, valide a reatividade com controles positivos específicos da espécie, pois a reatividade cruzada é relatada, mas não quantificada.

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