Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-PAK3 para WB, IHC-P, ELISA - O75914

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PAK3

• A PAK3 é uma serina/treonina-proteína quinase pertencente à família das quinases ativadas por p21 (PAK).
• Atua como um efetor a jusante das pequenas GTPases CDC42 e RAC1, regulando a dinâmica do citoesqueleto, a migração celular e a progressão do ciclo celular.
• Nos neurônios, a PAK3 desempenha um papel crítico na morfogênese das espinhas dendríticas, formação de sinapses e plasticidade sináptica, em parte através da fosforilação da cadeia leve reguladora da miosina II (MLC) para controlar a contratilidade da actomiosina.
• A PAK3 é altamente expressa no sistema nervoso, especificamente em neurônios pós-mitóticos do córtex cerebral e hipocampo em desenvolvimento e pós-natal.
• A quinase é ativada pela ligação à CDC42/RAC1 ativa, levando a uma mudança conformacional e autofosforilação em múltiplos resíduos de serina/treonina.
• A PAK3 fosforila alvos a jusante, como MAPK4, MAPK6 e TNNI3/troponina I, ligando-a à polimerização de F-actina mediada por MAPKAPK5 e à contratilidade do músculo cardíaco.
• Subcelularmente, a PAK3 localiza-se predominantemente no citoplasma.
• O splicing alternativo gera múltiplas isoformas; mutações na PAK3 estão associadas à deficiência intelectual ligada ao cromossomo X.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético correspondente à região N-terminal (aa 1-100) da PAK3 humana, sugerindo que o anticorpo provavelmente reconhece um epítopo dentro deste domínio, que pode ser conservado em camundongos e ratos.
• Para Western blot (WB), a banda prevista é de ~62 kDa; considere usar tecidos neuronais ou lisados celulares (por exemplo, cérebro, hipocampo) como controles positivos.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P), recomenda-se o uso de cortes de cérebro incluídos em parafina; métodos apropriados de recuperação de antígeno devem ser otimizados.
• O ELISA pode ser realizado com o peptídeo imunógeno ou proteína PAK3 recombinante; a reatividade cruzada com membros relacionados da família PAK deve ser avaliada.
• Como a PAK3 é expressa tanto no sistema nervoso em desenvolvimento quanto no adulto, pode ser necessária a validação específica por estágio de desenvolvimento.
• Inclua sempre controles negativos apropriados (por exemplo, linhagens celulares ou tecidos knockout) para confirmar a especificidade.

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