Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-PAK3 para WB, IF/ICC, ELISA - O75914

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PAK3

• O PAK3 (Serina/treonina-proteína cinase PAK 3) é um membro da família das cinases ativadas por p21 (PAK) e é predominantemente expresso em neurónios pós-mitóticos do córtex cerebral e do hipocampo (UniProt O75914, ESPECIFICIDADE DE TECIDO).
• Funciona como efetor a jusante das pequenas GTPases CDC42 e RAC1, e desempenha um papel fundamental na regulação do citoesqueleto, migração celular e regulação do ciclo celular (FUNÇÃO).
• O PAK3 é crítico para a morfogénese das espinhas dendríticas, formação de sinapses e plasticidade sináptica; em neurónios do hipocampo, é necessário para a formação de espinhas dendríticas e sinapses excitatórias (FUNÇÃO, ESPECIFICIDADE DE TECIDO).
• Após ativação pelo CDC42/RAC1, o PAK3 sofre alteração conformacional e autofosforilação em resíduos de serina/treonina, e depois fosforila alvos como MAPK4, MAPK6, MAPKAPK5 e TNNI3/troponina I para regular a polimerização de actina e a sensibilidade ao cálcio (FUNÇÃO).
• Substratos adicionais incluem a cadeia leve reguladora da miosina II (MLC), ligando a atividade da cinase PAK3 à contratilidade de actomiosina nas espinhas dendríticas (FUNÇÃO, Por similaridade).
• A proteína localiza-se no citoplasma (LOCALIZAÇÃO SUBCELULAR) e contém um domínio de ligação SH3 e um domínio semelhante à ubiquitina (PALAVRAS-CHAVE: ligação SH3, conjugação Ubl).
• O PAK3 está associado à deficiência intelectual ligada ao X (MRX30, MRX47, XLID30) e variantes estão ligadas à doença (PALAVRAS-CHAVE: variante de doença, deficiência intelectual).

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O anticorpo foi produzido contra um peptídeo sintético da região N-terminal (aa 1-100) do PAK3 humano (isoforma NP_001121638.1). Esta região pode estar presente em múltiplas isoformas; a especificidade deve ser verificada usando controlos específicos da isoforma.
• Para Western blot, o peso molecular esperado do PAK3 de comprimento total é aproximadamente 62 kDa; prepare lisados de linhas celulares neuronais relevantes ou tecidos cerebrais e inclua controlos positivos e negativos apropriados.
• Em imunofluorescência (IF/ICC), considere testar múltiplos protocolos de fixação/permeabilização e diluições do anticorpo para otimizar a deteção do PAK3 endógeno, que é citoplasmático.
• Aplicações de ELISA podem ser usadas para titular o anticorpo usando o peptídeo imunizante ou proteína recombinante; a reatividade cruzada com proteínas de rato e camundongo foi relatada, mas a validação no sistema de ensaio específico é recomendada.
• Como um anticorpo policlonal, a consistência entre lotes pode variar; aconselha-se testes preliminares com a sua configuração experimental.

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