Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-PARN para WB, IF/ICC, ELISA - O95453

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PARN

• PARN (Ribonuclease específica para poli(A)) é uma 3'-exorribonuclease com forte preferência por caudas poli(A) de mRNAs, iniciando a degradação de mRNA dependente de deadenilação. Referências relacionadas: PMID:10882133 PMID:11359775 PMID:12748283
• Interage tanto com a cauda 3'-poli(A) quanto com a estrutura do cap 5', um acoplamento essencial para deadenilação eficiente. Referências relacionadas: PMID:10882133 PMID:11359775 PMID:12748283
• PARN participa na degradação de mRNA mediada por nonsense (NMD) e na degradação de mRNAs instáveis contendo ARE, possivelmente através da interação com KHSRP. Referências relacionadas: PMID:10882133
• Além dos mRNAs, o PARN pode aparar caudas poli(A) de microRNAs (ex., MIR21) e snoRNAs da caixa H/ACA, influenciando sua estabilidade. Referências relacionadas: PMID:22442037 PMID:25049417
• A proteína localiza-se no núcleo, citoplasma e nucléolo, refletindo seus múltiplos papéis no metabolismo do RNA.
• PARN é expresso de forma ubíqua em tecidos humanos e pertence à família de nucleases deadenilantes; requer magnésio como cofator.
• Modificações pós-traducionais incluem acetilação e fosforilação, e o splicing alternativo gera múltiplas isoformas.
• Mutações no PARN estão associadas à disceratose congênita, ligando-o a distúrbios da biologia dos telômeros.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os 280 aminoácidos N-terminais; considere a acessibilidade do epítopo no desenho do seu ensaio. Para WB, sugere-se uma diluição inicial de 1:500–1:2000 com um anticorpo secundário adequado, com otimização baseada no nível de expressão da sua amostra.
• Em IF/ICC, as condições de fixação e permeabilização (ex., metanol vs. PFA/Triton) podem influenciar a detecção do antígeno; valide na sua linhagem celular de interesse. A distribuição nuclear/citoplasmática do PARN pode exigir controles cuidadosos de co-coloração.
• Para ELISA, a natureza policlonal pode melhorar a captura do sinal; considere emparelhar com um anticorpo monoclonal para um ELISA sanduíche. Valide com proteína recombinante ou lisados celulares expressando PARN humano.
• O MW previsto é ~73 kDa; confirme executando marcadores de peso molecular apropriados e considere possíveis desvios dependentes da isoforma.

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