Anticorpo Policlonais Anti-PARP1 para WB, IF/ICC, ELISA - P09874

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PARP1

• PARP1 é uma enzima nuclear altamente conservada que catalisa a transferência de ADP-ribose do NAD+ para proteínas alvo, desempenhando um papel fundamental no reparo de quebras de fita simples de DNA pela via de reparo por excisão de base (BER). Referências relacionadas: PMID:17177976, PMID:18055453, PMID:18172500
• Também participa do reparo de quebras de fita dupla por recombinação homóloga, promovendo o recrutamento de fatores de reparo aos locais de dano. Referências relacionadas: PMID:26344098, PMID:30356214
• Em resposta ao dano de DNA, PARP1 medeia a ADP-ribosilação de serina em histonas, facilitando a descompactação da cromatina e o acesso dos fatores de reparo; essa atividade depende do seu cofator HPF1. Referências relacionadas: PMID:28190768, PMID:29954836, PMID:32028527
• Além do reparo de DNA, PARP1 atua como regulador transcricional, reprimindo ou ativando a transcrição ao modular a estrutura da cromatina ou fatores de alongamento. Referências relacionadas: PMID:15607977, PMID:22464733, PMID:27256882
• PARP1 é um mediador chave do parthanatos, uma via de morte celular independente de caspase; após a apoptose, a clivagem pela caspase-3/7 gera um fragmento que se transloca para o citoplasma e desencadeia a morte celular mediada por AIFM1. Referências relacionadas: PMID:33168626
• A proteína localiza-se predominantemente no núcleo e nos cromossomos, com presença adicional no nucléolo; também pode se deslocar para o citoplasma sob certas condições.
• PARP1 sofre extensas modificações pós-traducionais, especialmente a auto-poli-ADP-ribosilação, que regula sua atividade; também contém múltiplos motivos de dedo de zinco essenciais para a ligação ao DNA.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aa 81-390) está localizado no domínio de ligação ao DNA; se você estiver estudando apoptose, verifique se o anticorpo reconhece tanto o PARP1 de comprimento completo quanto o clivado.
• Para Western blot, PARP1 tem um peso molecular previsto de ~113 kDa; use condições de transferência adequadas para proteínas de grande tamanho.
• Em IF/ICC, garanta uma fixação e permeabilização adequadas para detectar o PARP1 nuclear; faça a co-coloração com um marcador de dano de DNA para confirmar a localização.
• Para ELISA, titule o anticorpo e use agentes de bloqueio adequados para minimizar o ruído de fundo.
• A consistência entre lotes deve ser validada, pois se trata de um anticorpo policlonal.

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