Anticorpo Policlonais Anti-PARP1 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P09874

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PARP1

• PARP1 é uma enzima nuclear que catalisa a poli(ADP-ribosil)ação de proteínas alvo, desempenhando um papel central no reparo de DNA, manutenção do genoma e morte celular. Referências relacionadas: PMID:17177976, PMID:18055453, PMID:18172500
• Como um sensor de dano ao DNA, a PARP1 se liga a quebras simples e duplas de fita e, junto com HPF1, catalisa a ADP-ribosilação de serina em histonas e outras proteínas da cromatina para promover o relaxamento da cromatina e o recrutamento de fatores de reparo. Referências relacionadas: PMID:17177976, PMID:18172500, PMID:19344625, PMID:28190768, PMID:29954836
• A PARP1 também pode mediar a ADP-ribosilação de glutamato/aspartato por interação com NMNAT1, e a ADP-ribosilação de tirosina com HPF1, demonstrando especificidade de resíduo dependente do cofator. Referências relacionadas: PMID:25043379, PMID:28190768, PMID:29954836, PMID:30257210
• Além do reparo, a PARP1 funciona como um regulador transcricional, agindo tanto como repressor (modificando a estrutura da cromatina) quanto como fator de alongamento positivo ou negativo, dependendo do contexto. Referências relacionadas: PMID:15607977, PMID:22464733, PMID:27256882, PMID:35393539
• A PARP1 participa das vias de morte celular programada: sua proteína de comprimento total está envolvida no parthanatos, enquanto a clivagem dependente de caspase gera um fragmento de 89 kDa que promove a apoptose mediada por AIFM1. Referências relacionadas: PMID:33168626
• Subcelularmente, a PARP1 se localiza principalmente no núcleo e nucléolo, mas pode translocar para o citoplasma ou se ligar aos cromossomos, especialmente durante danos ao DNA ou apoptose.
• A PARP1 contém vários domínios de dedo de zinco para ligação ao DNA e um domínio catalítico, e sua atividade é regulada por modificações pós-traducionais, incluindo auto-ADP-ribosilação, acetilação e fosforilação.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde ao domínio catalítico C-terminal (aa 662-1014). Portanto, o anticorpo pode reconhecer tanto a PARP1 de comprimento total (~113 kDa) quanto o fragmento C-terminal clivado por caspase (~89 kDa) em WB. Para estudos de apoptose, considere usar indutores apropriados e validar os padrões de clivagem.
• Em IHC-P, espera-se uma coloração predominantemente nuclear; no entanto, sinais citoplasmáticos ou nucleolares podem aparecer dependendo do estado celular ou do processamento do tecido. Sempre inclua controles positivos (ex.: células em proliferação) e negativos.
• Para IF/ICC, os protocolos de permeabilização e fixação devem ser otimizados, pois a PARP1 está fortemente ligada à cromatina. A fixação com Triton X-100 ou metanol pode ser útil.
• Aplicações em ELISA podem exigir titulação do anticorpo; antígenos recombinantes ou lisados celulares podem ser utilizados.

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