Anticorpo policlonal anti-PBEF/Visfatin/NAMPT para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P43490

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização de PBEF/Visfatin/NAMPT

• PBEF/Visfatin/NAMPT, também conhecida como nicotinamida fosforribosiltransferase, fator 1 de aumento de colônias de pré-células B ou visfatina, é a enzima limitante da velocidade na biossíntese de NAD em mamíferos, catalisando a condensação da nicotinamida com 5-fosforribosil-1-pirofosfato para produzir mononucleotídeo de nicotinamida.
• A proteína existe em múltiplas formas: intracelularmente, como uma enzima ativa, e em uma forma secretada que atua como citocina (imunomoduladora) e adipocina (antidiabética), embora a forma secretada não apresente atividade enzimática devido aos baixos níveis de ATP extracelular.
• Ela desempenha um papel fundamental na regulação do ritmo circadiano por meio da produção oscilatória de NAD dependente de NAMPT, que modula a atividade transcricional de CLOCK-BMAL1 por meio da supressão mediada por SIRT1 dependente de NAD.
• Codificada pelo gene NAMPT (também conhecido como PBEF ou PBEF1), é uma glicosiltransferase envolvida na biossíntese de nucleotídeos de piridina.
• Subcelularmente, a NAMPT é encontrada no núcleo e no citoplasma, podendo ser secretada no espaço extracelular.
• A expressão tecidual é proeminente na medula óssea, no fígado e nos músculos, com presença adicional no coração, na placenta, nos pulmões e nos rins.
• A proteína sofre múltiplas modificações pós-traducionais, incluindo acetilação e fosforilação, que podem regular sua função e localização.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 181-382 da NAMPT humana, uma região que pode estar acessível à ligação do anticorpo em várias conformações; considere condições desnaturantes ou nativas de acordo com a aplicação.
• Para WB, espera-se uma banda em torno de 56 kDa; valide em lisados de amostras humanas, de camundongo ou de rato para confirmar a detecção.
• IHC-P e IF/ICC podem exigir otimização da fixação e da permeabilização para detectar tanto os reservatórios nucleares/citoplasmáticos quanto os de proteína secretada.
• As aplicações de ELISA podem ser desenvolvidas para capturar a forma solúvel da NAMPT em soro ou sobrenadantes de cultura; inclua padrões e controles apropriados.
• Ao utilizar espécies com reatividade cruzada, verifique a homologia da sequência na região do imunógeno para garantir o reconhecimento específico.

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