Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-PCCB [Validado por KO] para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P05166

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de PCCB (Cadeia Beta da Propionil-CoA Carboxilase)

• O gene PCCB codifica a subunidade beta da propionil-CoA carboxilase (PCC), uma enzima mitocondrial dependente de biotina; o splicing alternativo gera múltiplas isoformas.
• A PCC catalisa a carboxilação de propionil-CoA em D-metilmalonil-CoA, uma etapa fundamental no catabolismo de ácidos graxos de cadeia ímpar e aminoácidos de cadeia ramificada (isoleucina, treonina, metionina, valina). Referências relacionadas: PMID:15890657 PMID:6765947
• Dentro do holoenzima, a subunidade alfa medeia a carboxilação da biotina dependente de ATP, enquanto a subunidade beta transfere o grupo carboxila da biotina para o propionil-CoA (Por similaridade).
• A enzima também apresenta atividade contra butiril-CoA, gerando etilmalonil-CoA, e pode atuar sobre crotonoil-CoA como substrato alternativo (Por similaridade). Referências relacionadas: PMID:6765947
• PCCB se localiza exclusivamente na matriz mitocondrial.
• A proteína sofre acetilação e fosforilação e contém um peptídeo de trânsito mitocondrial; mutações no gene PCCB estão ligadas à acidemia propiônica, um distúrbio metabólico autossômico recessivo.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo foi validado usando modelos de knockout (KO); inclua controles positivos e negativos apropriados nos seus experimentos para confirmar a especificidade.
• Para Western blotting, a proteína alvo migra em aproximadamente 58 kDa; use um gel de SDS-PAGE de 10% ou 12% e otimize as condições de transferência para proteínas de tamanho médio.
• Em imunohistoquímica (IHC-P) e imunofluorescência (IF/ICC), verifique a coloração em tecidos ricos em mitocôndrias ou linhas celulares com expressão conhecida de PCCB, usando marcadores mitocondriais como referência de colocalização.
• O imunógeno abrange os aminoácidos 260–539 da PCCB humana, correspondendo a uma região provavelmente envolvida nas interações entre subunidades; isso pode ajudar a detectar formas nativas e desnaturadas em diferentes aplicações.
• Ao montar ensaios de ELISA, considere testar uma ampla faixa de diluição e usar a proteína PCCB recombinante como padrão para determinar as concentrações de trabalho ideais.

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