Anticorpo Monoclonal Anti-PCK1 (PEPCK-C) para Western Blot e ELISA - P35558

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PCK1

• PCK1 (fosfoenolpiruvato carboxiquinase 1) é a isoforma citosólica da PEPCK, atuando como a enzima limitante da velocidade da gliconeogênese. Catalisa a descarboxilação reversível e a fosforilação do oxaloacetato a fosfoenolpiruvato, equilibrando os fluxos catapleróticos e anapleróticos no ciclo do ácido cítrico. Referências relacionadas: PMID:24863970, PMID:26971250, PMID:28216384

• Sob condições de baixa glicose, o PCK1 impulsiona a conversão cataplerótica do oxaloacetato a fosfoenolpiruvato para a gliconeogênese; sob alta glicose, promove a conversão anaplerótica do fosfoenolpiruvato a oxaloacetato. Referências relacionadas: PMID:30193097

• Além de sua função metabólica, a fosforilação em Ser-90 pela AKT1 altera o PCK1 para uma serina-proteína quinase. Esta atividade quinase "moonlighting" (secundária) desencadeia a translocação para o retículo endoplasmático, onde fosforila INSIG1/2 para liberar fatores de transcrição SREBP e ativar a expressão gênica lipogênica. Referências relacionadas: PMID:32322062

• O PCK1 contribui para a homeostase de células T CD8+ de memória, fornecendo fosfoenolpiruvato para as vias do glicogênio e da pentose fosfato (por similaridade).

• A nível subcelular, o PCK1 é predominantemente citosólico, mas após a fosforilação mediada por AKT, ele transloca para o retículo endoplasmático.

• Os principais locais de expressão tecidual incluem o fígado, rim e adipócitos, refletindo seu papel central no metabolismo de glicose e lipídios.

• Modificações pós-traducionais incluem acetilação, ubiquitinação e fosforilação, e estruturalmente o PCK1 é classificado como uma quinase de ligação a GTP, liase e descarboxilase.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno foi gerado contra um peptídeo sintético que abrange os aminoácidos 523–622 próximo ao terminal C, distal do local de fosforilação Ser-90; considere isso ao projetar experimentos de detecção específica para fosfo ou isoforma.
• Para Western blot, valide a detecção em lisados de fígado/rim humano, de camundongo ou de rato, pois esses tecidos expressam altos níveis de PCK1. A indução da gliconeogênese (por exemplo, tratamento com jejum/cAMP) pode aumentar o sinal.
• Em ELISA, teste o emparelhamento de anticorpos e a compatibilidade com formatos sanduíche; a natureza monoclonal garante especificidade consistente entre lotes.
• Dado o peso molecular previsto de 69 kDa, certifique-se de resolução adequada do gel e condições de transferência; modificações pós-traducionais podem deslocar a banda observada.

CamelBio: Sua Ponte de Aquisição Tudo-em-Um

A CamelBio fornece aos fabricantes de diagnósticos e laboratórios de pesquisa metabólica acesso tudo-em-um a matérias-primas IVD validadas, incluindo anticorpos monoclonais e policlonais como este clone PCK1. Desde reagentes auxiliares a granel até o fornecimento de matérias-primas para alvos raros, apoiamos todo o seu fluxo de trabalho de desenvolvimento de ensaios—ajudando-o a avançar sem problemas do conceito à clínica. Para estudos de gliconeogênese, diabetes ou metabolismo lipídico, nosso fornecimento de anticorpo PCK1 pode ser combinado com pares de anticorpos otimizados e consultoria técnica.