Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-PCK1 para WB - P35558

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PCK1

• Catalisa a descarboxilação reversível e fosforilação do oxaloacetato em fosfoenolpiruvato (PEP), atuando como a enzima limitante da velocidade na gliconeogênese.
  Referências relacionadas: PMID:24863970, PMID:26971250, PMID:28216384
• Regula a cataplerose e anaplerose: com baixa concentração de glicose, converte oxaloacetato em PEP; com alta concentração de glicose, promove a reação reversa para repor os intermediários do ciclo do ácido cítrico.
  Referências relacionadas: PMID:30193097
• Atua como proteína quinase quando fosforilada em Ser-90 pela AKT1, se translocando para o retículo endoplasmático para fosforilar proteínas INSIG, ativando assim a lipogênese mediada por SREBP.
  Referências relacionadas: PMID:32322062
• É expressa predominantemente no fígado, rim e adipócitos.
• A localização subcelular inclui citoplasma, citosol e retículo endoplasmático.
• Requer GTP e manganês como cofatores; sofre acetilação, fosforilação e ubiquitinação que modulam sua atividade e estabilidade.
• O splicing alternativo gera múltiplas isoformas com potencial diversidade funcional.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blot, otimize a diluição entre 1:500 e 1:2000 usando lisados de fígado ou rim como controles positivos. A banda prevista é de ~69 kDa.
• Na imunoprecipitação, considere usar 1–2 µg de anticorpo por 500 µg de lisado em condições não desnaturantes padrão.
• Para imunofluorescência, fixe e permeabilize as células; o sinal de PCK1 é esperado no citoplasma e RE, não na membrana plasmática.
• ELISA: O anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção; recomenda-se o pareamento com um anticorpo correspondente validado para ensaios sanduíche.
• Valide a reatividade cruzada em amostras de camundongo e rato antes de estudos em larga escala.

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