Anticorpo policlonal de coelho anti-PD-L1/CD274 para WB, IF-P, IHC-P, ELISA - Q9NZQ7

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização de PD-L1/CD274

• PD-L1 (ligando 1 da morte celular programada 1), também conhecido como B7-H1, é codificado pelo gene CD274; é um membro da família B7 de ligandos da superfamília das imunoglobulinas.
• Como ligando do recetor inibitório PD-1, o PD-L1 desempenha um papel fundamental na indução e manutenção da tolerância imunitária ao próprio, modulando o limiar de ativação das células T e limitando as respostas efetoras das células T. Referências relacionadas: PMID:11015443, PMID:28813410, PMID:28813417
• O PD-L1 também pode coestimular subpopulações de células T que produzem predominantemente interleucina-10 (IL-10) através de um recetor ativador ainda não identificado. Referências relacionadas: PMID:10581077
• Em resposta à hipóxia, o PD-L1 desloca-se para o núcleo através da sua interação com STAT3 fosforilado e atua como coativador transcricional para promover a transcrição de GSDMC, conduzindo à piroptose. Referências relacionadas: PMID:32929201
• O PD-L1 é principalmente uma proteína transmembranar localizada na membrana celular, na membrana dos endossomas precoces e na membrana dos endossomas de reciclagem; também pode ser secretado e, mediante estímulos específicos, entrar no núcleo.
• É amplamente expresso em tecidos como o coração, o músculo esquelético, a placenta e o pulmão, bem como em células imunitárias ativadas, incluindo células T, células B, células dendríticas e monócitos. As células tumorais frequentemente aumentam a expressão de PD-L1 para explorar a via inibitória PD-1, atenuando a imunidade antitumoral e promovendo a evasão imunitária, o que o torna um alvo importante para a imunoterapia contra o cancro.
• O PD-L1 é uma glicoproteína que contém ligações dissulfureto e potenciais locais de conjugação semelhantes à ubiquitina, os quais podem influenciar a sua estabilidade e as interações com os recetores.

Orientações experimentais e recomendações técnicas

• O imunogénio corresponde ao domínio extracelular (resíduos 190–290) do PD-L1 humano, que contém a região semelhante a IgV, essencial para a interação com PD-1; este desenho permite a deteção tanto das formas de comprimento total como das formas solúveis.
• Na transferência de Western, prevê-se uma banda principal próxima de 33 kDa, mas a glicosilação pode deslocar o peso molecular aparente para 40–50 kDa; recomenda-se considerar controlos positivos provenientes da placenta, do pulmão ou de células imunitárias ativadas.
• Para imunohistoquímica (IHC-P) e imunofluorescência (IF-P), recomenda-se a utilização de técnicas padrão de recuperação antigénica e a otimização das condições de bloqueio; a reatividade cruzada do anticorpo com PD-L1 de ratinho e de rato permite a realização de estudos em várias espécies.
• As aplicações de ELISA podem ser desenvolvidas utilizando o anticorpo como reagente de captura ou de deteção, após a validação adequada.

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