Anticorpo Policlonal Anti-PDE3A para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q14432

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PDE3A

• PDE3A, também conhecida como fosfodiesterase A inibida por cGMP (CGI-PDE A), é uma fosfodiesterase de nucleotídeos cíclicos que hidrolisa especificamente os segundos mensageiros cAMP e cGMP, desempenhando um papel crucial na regulação de processos fisiológicos como a função cardiovascular e a secreção de insulina.
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• Além disso, a PDE3A apresenta atividade catalítica sobre o cUMP, ampliando ainda mais sua especificidade de substrato.
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• Além de seu papel enzimático, a PDE3A participa de uma via de sinalização pró-apoptótica induzida por estradiol (E2), independente de sua atividade de fosfodiesterase. O E2 estabiliza o complexo PDE3A/SLFN12 no citosol, levando à desfosforilação de SLFN12 e à ativação de sua atividade de ribonuclease, que finalmente desencadeia a apoptose. Esta via está implicada na remodelação da placenta.
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• A proteína está predominantemente localizada na membrana e no citosol, o que é consistente com seus papéis na transdução de sinal e na apoptose.

• As características estruturais principais incluem uma hélice transmembranar e múltiplas modificações pós-traducionais (fosforilação, ligação isopeptídica, conjugação Ubl), e requer manganês como cofator metálico para a catálise.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aminoácidos 380–660) corresponde a uma região da PDE3A que inclui partes do domínio catalítico. Este design pode gerar anticorpos que reconhecem a PDE3A nativa com potencial para interferência funcional; no entanto, os usuários devem realizar a validação no contexto específico do seu ensaio.

• Para aplicações de WB, é esperada uma banda de ~125 kDa; considere usar controles apropriados e verificar com lisados de células positivas (por exemplo, humano, camundongo, rato).

• Para IHC-P e IF/ICC, recomenda-se a otimização da recuperação de antígeno e da diluição do anticorpo, pois seções embebidas em parafina e fixadas em formalina podem mascarar epítopos.

• Embora a reatividade cruzada com humano, camundongo e rato esteja indicada, os usuários devem confirmar a reatividade na espécie de seu interesse, especialmente se estiverem usando amostras com baixos níveis de expressão.

• O desempenho do anticorpo em ELISA indica sua adequação para detecção quantitativa; para o desenvolvimento de ELISA sanduíche, é aconselhado o pareamento com um anticorpo de detecção compatível.

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