Anticorpo Policlonal Anti-PDE4A para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P27815

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PDE4A

• A PDE4A, também conhecida como fosfodiesterase 4A específica para cAMP, é um membro da família das fosfodiesterases 4 que hidrolisa especificamente o segundo mensageiro 3',5'-AMP cíclico (cAMP) em AMP, regulando negativamente as vias de sinalização do cAMP.
• A enzima desempenha um papel crítico na sinalização celular ao controlar as concentrações intracelulares de cAMP, influenciando processos como inflamação, contração do músculo liso e função cognitiva.
• A PDE4A é caracterizada por sua independência de cálcio, calmodulina e níveis de GMPc; ela não hidrolisa o GMPc, o que a distingue de outras fosfodiesterases.
• O gene sofre splicing alternativo, produzindo múltiplas isoformas com características regulatórias e distribuições teciduais distintas.
• Subcelularmente, a PDE4A se localiza no citoplasma, região perinuclear, citosol, membrana e projeções celulares como as membranas dos ruffles, indicando envolvimento na sinalização compartimentada do cAMP.
• Ela é altamente expressa em órgãos como fígado, estômago, testículo, tireoide, glândulas adrenais, coração e intestino delgado, além de vários subconjuntos de células imunológicas como células T, células dendríticas, macrófagos e mastócitos.
• As modificações pós-traduccionais incluem fosforilação, ubiquitinação e formação de ligação isopeptídica, com a proteína ligando íons manganês e zinco como cofatores.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• A sequência do imunógeno (aminoácidos 325-410) corresponde a uma região dentro do domínio catalítico; verifique a especificidade do anticorpo contra as isoformas desejadas usando WB com proteínas recombinantes ou lisados celulares de espécies relevantes.
• Para WB, é esperada uma banda em torno de 98 kDa; considere usar lisados de controle positivo de tecidos com alta expressão de PDE4A (por exemplo, fígado, coração) ou de células imunológicas estimuladas.
• Em IHC-P e IF/ICC, inclua controles de tecido negativos e positivos (por exemplo, tecidos humanos ou de roedores com padrões de expressão conhecidos) e otimize as condições de recuperação de antígeno.
• Aplicações em ELISA podem exigir titulação cuidadosa para atingir a relação sinal-ruído ideal; a reatividade cruzada com camundongo e rato suporta ensaios multiespécies, mas sempre valide no seu sistema experimental específico.

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