Anticorpo Policlonal Anti-PDGFB para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P01127

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PDGFB

• O PDGFB, também conhecido como PDGF-2, cadeia B do fator de crescimento derivado de plaquetas, polipéptido beta e proto-oncogene c-Sis, é um fator de crescimento secretado codificado pelo gene PDGFB (sinónimos: PDGF2, SIS).
• Funciona como um potente mitogénio para células mesenquimais, impulsionando a proliferação, migração, sobrevivência e quimiotaxia celular durante o desenvolvimento embrionário e a homeostase tecidual. Referências relacionadas: PMID:26599395
• O PDGFB é essencial para o desenvolvimento vascular normal: é necessário para a proliferação e recrutamento de pericitos e células musculares lisas vasculares no sistema nervoso central, pele, pulmão, coração e placenta, e para a formação de vasos sanguíneos e glomérulos renais.
• Desempenha um papel crítico na cicatrização de feridas, onde estimula a quimiotaxia e proliferação de fibroblastos e células musculares lisas.
• A sinalização do PDGFB é modulada pela formação de heterodímeros com o PDGFA (subunidade A do fator de crescimento derivado de plaquetas), alterando a ligação ao recetor e os efeitos a jusante.
• A proteína é secretada e contém ligações dissulfeto características e glicosilação, contribuindo para a sua estabilidade e dimerização.
• A expressão tecidual é maior no coração, substância negra do cérebro, placenta e rim fetal, com níveis moderados no hipocampo, músculo esquelético, rim adulto e pulmão.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio é um peptídeo sintético que abrange os aminoácidos 140–241 do PDGFB humano, que deve reconhecer tanto a forma precursora como a madura da proteína.
• Para o Western blot (WB), espera-se uma banda de aproximadamente 27 kDa em condições redutoras. Em condições não redutoras, formas diméricas podem aparecer em pesos moleculares mais elevados devido a ligações dissulfeto intercadeias; considere comparar as condições redutoras vs. não redutoras para distinguir populações monoméricas e diméricas.
• Na imuno-histoquímica (IHC-P) e imunofluorescência (IF/ICC), a recuperação de antigénio (por exemplo, tampão citrato mediado por calor) é recomendada devido à natureza secretada do PDGFB; a permeabilização é necessária para a deteção intracelular.
• Para ELISA, use um antigénio de revestimento correspondente à região do imunogénio ou proteína PDGFB recombinante; execute uma curva padrão para determinar as concentrações ótimas de anticorpos de captura e deteção.
• A reatividade cruzada é relatada com humano e rato; valide em rato ou outras espécies se necessário, pois a homologia da sequência pode variar.
• Inclua sempre controlos positivos e negativos apropriados (por exemplo, lisado celular com superexpressão de PDGFB vs. knockout ou tecido conhecido por falta de expressão) para confirmar a especificidade.

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