Anticorpo monoclonal anti-PDGFRa para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P16234

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização do PDGFRa

• O PDGFRa (receptor alfa do fator de crescimento derivado de plaquetas) é um receptor tirosina-proteína-quinase para PDGFA, PDGFB e PDGFC, codificado pelo gene PDGFRA em humanos. Também é conhecido como CD140A, PDGFR2 ou receptor alfa do fator de crescimento derivado de plaquetas.
• Após a ligação ao ligante, o PDGFRa dimeriza e ativa múltiplas cascatas de sinalização a jusante, incluindo as vias PI3K/AKT, RAS-MAPK e PLCG1, regulando a proliferação celular, a sobrevivência, a quimiotaxia e a diferenciação. Desempenha papéis críticos no desenvolvimento embrionário, na formação do esqueleto e no desenvolvimento da mucosa do trato gastrointestinal.
• O PDGFRa é uma proteína transmembrana de passagem única localizada na membrana celular, sendo também encontrado no aparelho de Golgi e no cílio primário. Contém domínios semelhantes a imunoglobulinas em sua região extracelular e um domínio intracelular de tirosina-quinase dividido.
• O receptor é amplamente expresso, particularmente em fibroblastos, músculo liso, coração, cérebro e embriões, e é detectado em plaquetas e tumores do cólon. Sua expressão é importante na diferenciação de células-tronco mesenquimais e na cicatrização de feridas.
• As principais modificações pós-traducionais incluem glicosilação ligada a N, autofosforilação em resíduos de tirosina após a ativação e ubiquitinação, que regulam sua sinalização e redução de expressão. É classificado como um proto-oncogene, com mutações associadas a cânceres e distúrbios do desenvolvimento (por exemplo, tumores estromais gastrointestinais).
• O PDGFRa pode formar heterodímeros com o PDGFRB, modulando a especificidade e a intensidade do sinal dependendo da isoforma do ligante. A sinalização do receptor é atenuada por fosfatases e pela internalização do receptor.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno abrange o domínio extracelular (aa 24-528), portanto, é provável que este anticorpo reconheça a região extracelular. Considere esse aspecto ao planejar os experimentos, por exemplo, em condições não redutoras ou para a detecção de proteína nativa.
• Para Western blot (WB), o peso previsto da proteína é de aproximadamente 123 kDa (pode aparecer como uma banda em torno de 170-180 kDa devido à glicosilação). Valide no sistema de amostra relevante, pois os níveis de expressão podem variar.
• Na imuno-histoquímica (IHC-P) e na imunofluorescência (IF/ICC), otimize a recuperação antigênica e a permeabilização. A reatividade cruzada com camundongo e rato permite o uso em organismos-modelo comuns.
• Para ELISA e imunoprecipitação (IP), certifique-se de que o anticorpo seja compatível com a conformação nativa do seu alvo. Inclua sempre controles apropriados.

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