Anticorpo policlonal de coelho Anti-PDGFRA/PDGFR alfa para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P16234

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PDGFR alfa

• PDGFR alfa (CD140a, PDGFR2) é um receptor tirosina quinase de superfície celular codificado pelo gene PDGFRA, funcionando como receptor de alta afinidade para os fatores de crescimento derivados de plaquetas PDGFA, PDGFB e PDGFC.
• A ligação do ligante induz a dimerização e autofosforilação do receptor, ativando cascatas de sinalização downstream chave incluindo as vias RAS/MAPK, PI3K/AKT, PLCG1 e STAT para regular a proliferação, sobrevivência, migração e quimiotaxia celular.
• Desempenha um papel essencial no desenvolvimento embrionário, particularmente no desenvolvimento esquelético, fechamento cefálico e morfogênese do trato gastrointestinal, e também é necessário para a diferenciação de células-tronco mesenquimais.
• Apresenta papéis duais dependentes do contexto, sendo capaz de promover ou inibir a proliferação e migração celular dependendo do ambiente celular e da composição do ligante.
• Está envolvido na cicatrização de feridas e na biologia plaquetária, contribuindo para a ativação de plaquetas, secreção de agonistas e agregação induzida por trombina.
• Existem isoformas produzidas por splicing alternativo; o receptor canônico de comprimento total se localiza predominantemente na membrana celular, mas também é encontrado no aparelho de Golgi e no cílio primário, indicando tráfego intracelular e compartimentalização da sinalização.
• É amplamente expresso em diversos tecidos, sendo detectado no cérebro, fibroblastos, músculo liso, coração, plaquetas e tanto no tecido colônico normal quanto tumoral, destacando seus papéis tanto na fisiologia normal quanto na oncogênese.
• É modificado pós-traducional por fosforilação, glicosilação, formação de pontes dissulfeto e ubiquitinação, que regulam a atividade, estabilidade e resultado da sinalização do receptor.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno cobre o domínio intracelular (aa 896-1059), tornando este anticorpo adequado para detectar PDGFR alfa total em Western blotting sob condições redutoras; a banda prevista é de ~123 kDa, mas a glicosilação pode causar um desvio de mobilidade.
• Para imuno-histoquímica em cortes de parafina (IHC-P), considere a recuperação de antígeno induzida por calor, pois receptores de membrana podem ficar mascarados; teste diferentes soluções de recuperação para otimizar o sinal.
• Quando usado em imunofluorescência/ICC, espera-se coloração membranosa e possivelmente perinuclear (Golgi); valide a especificidade com controles apropriados, como linhagens de célula com knockdown ou knockout de PDGFRA.
• Este anticorpo pode reconhecer PDGFR alfa tanto humano quanto roedor (camundongo/rato), mas a reatividade cruzada com outras espécies deve ser verificada experimentalmente.
• Para ELISA, o desempenho depende do método de revestimento e do pareamento de anticorpos; recomenda-se um teste piloto com a proteína recombinante de PDGFR alfa para estabelecer as concentrações de trabalho ideais.

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