Anti-PDK1/PDPK1 Anticorpo Policlonal de Coelho para WB e ELISA - O15530

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PDK1/PDPK1

• PDK1 (proteína quinase 1 dependente de 3-fosfoinositídeo) é uma serina/treonina quinase que funciona como uma quinase mestre para a família de quinases AGC, fosforilando e ativando múltiplos alvos a jusante. Referências relacionadas: PMID:10226025, PMID:10480933, PMID:10995762

• Ativa proteínas de sinalização chave como AKT/PKB, quinase p70 S6, p90 RSK, isoformas de PKC, SGK e PAK1, desempenhando assim um papel central na transdução de sinal de insulina, regulação da proliferação celular, sobrevivência e metabolismo. Referências relacionadas: PMID:10226025, PMID:10480933, PMID:10995762, PMID:12167717, PMID:9094314

• PDK1 regula negativamente a sinalização TGF-beta modulando interações e fosforilação de proteínas SMAD, impedindo o acúmulo nuclear de SMAD3 e SMAD4. Referências relacionadas: PMID:17327236

• Ativa a via NF-kappa-B via fosforilação de IKKB e regula a dinâmica de adesões focais através da fosforilação de tirosina. Referências relacionadas: PMID:16207722, PMID:14585963

• PDK1 é essencial para a motilidade e quimiotaxia de células endoteliais vasculares, participa na entrada de cálcio e função de mastócitos, e desempenha papéis críticos na homeostase cardíaca e desenvolvimento de timócitos. Referências relacionadas: PMID:17371830

• A nível subcelular, o PDK1 localiza-se no citoplasma, núcleo, membrana celular e adesões focais, permitindo suas diversas funções de sinalização.

• Modificações pós-traducionais incluem acetilação, fosforilação (notavelmente Tyr-9, elevada em tecidos doentes) e conjugação de ubiquitina.

• PDK1 é expresso ubiquamente, e a forma fosforilada em Tyr-9 é marcadamente aumentada em tecidos doentes de pulmão, fígado, cólon e mama em comparação com o normal.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 409-556 do PDK1 humano, uma região dentro da porção C-terminal do domínio da quinase. Considere que o anticorpo pode reconhecer formas de PDK1 fosforiladas e não fosforiladas; estados específicos de fosforilação devem ser validados de forma independente.
• Para Western blot, espera-se uma banda em torno de 63 kDa. Use controles de carregamento apropriados e valide a detecção em lisados celulares de humano, camundongo ou rato. Para ELISA, garanta condições de revestimento ótimas e titulação do anticorpo.
• Dado o papel do PDK1 na sinalização de insulina e fatores de crescimento, considere estimular as células com insulina ou soro para avaliar alterações relacionadas à ativação da via na expressão ou fosforilação do PDK1.

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