Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-PEPCK/PCK2 (Validado por KO) para WB, IF/ICC, ELISA - Q16822

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PEPCK/PCK2

• Codificada pelo gene PCK2, também conhecida como PEPCK2 ou PEPCK-M, esta proteína mitocondrial funciona como uma fosfoenolpiruvato carboxicinase (PEPCK) e uma serina/treonina-proteína quinase.
• Catalisa a conversão de oxaloacetato em fosfoenolpiruvato, o passo limitante da taxa na gliconeogênese e gliceroneogênese, usando GTP como doador de fosfato (PubMed:28955899). Referências relacionadas: PMID:28955899
• Sua atividade quinase fosforila e ativa a ACSL4, promovendo assim a ferroptose, uma forma de morte celular regulada (PubMed:38720107). Referências relacionadas: PMID:38720107
• Pertence à família de carboxicinases PEPCK, que desempenham papéis críticos no metabolismo energético e na homeostase da glicose.
• Localiza-se exclusivamente na mitocôndria, onde se integra nas vias metabólicas do ciclo do ácido cítrico.
• Expressa amplamente em múltiplos tecidos, consistente com suas funções metabólicas de manutenção celular.
• Anotada com diversas palavras-chave incluindo Acetilação, Splicing alternativo, Descarboxilase, Liase, Manganês, Ligação a metal, Ligação a nucleotídeo e Peptídeo de trânsito, indicando regulação complexa e propriedades enzimáticas.
• O peso molecular é aproximadamente 71 kDa, mas pode variar devido a modificações pós-traducionais ou splicing alternativo.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região C-terminal (aa 550-640); o anticorpo pode detectar tanto as formas de comprimento total quanto as truncadas de PCK2, mas a validação em sistemas de amostra relevantes é recomendada.
• Para Western blot, considere o uso de lisados celulares humanos, de camundongo ou rato ou frações mitocondriais como controles positivos; espera-se uma banda próxima a 71 kDa.
• Para imunofluorescência ou ICC, os padrões de coloração mitocondrial devem ser confirmados com marcadores específicos de organelas.
• Devido à validação por KO, o anticorpo pode ser empregado em experimentos de nocaute/resgate para demonstrar especificidade do alvo.
• Protocolos de ELISA podem exigir a imobilização de PCK2 recombinante ou a captura da proteína endógena de lisados; realize titulação sob suas condições de ensaio.

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