Anticorpo Policlonal Anti-PER2 para WB, IHC-P, ELISA, ChIP - O15055

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PER2

• O PER2 é um repressor transcricional e componente central do relógio circadiano, gerando ritmos de aproximadamente 24 horas na expressão gênica que regulam o metabolismo, o sono, a temperatura corporal e a função imunológica.
• Atua no ciclo de feedback de transcrição/tradução (TTFL) formando um ramo negativo: junto com CRY1/2, inibe a atividade do heterodímero CLOCK/NPAS2-BMAL1/BMAL2, reprimindo sua própria expressão.
• O PER2 também recruta complexos de modificação da cromatina (SIN3-HDAC, metiltransferases H3K9) para os promotores e locais de terminação de genes-alvo, regulando o início e o alongamento da transcrição.
• Subcelularmente, o PER2 localiza-se no núcleo, citoplasma, região perinuclear e nucléolo, realizando trânsito como parte da regulação do relógio.
• Modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, acetilação e ubiquitinação, ajustam a estabilidade do PER2 e o comprimento do período circadiano.
• Amplamente expresso com os níveis mais altos no músculo esquelético e pâncreas; o isoforma 2 é detectado em queratinócitos. Mutações no PER2 causam a síndrome familiar de fase avançada do sono (FASPS).
• O PER2 está envolvido na regulação metabólica, atuando como coativador do PPARA e correpessor do NR1D1, afetando o metabolismo lipídico e os níveis de insulina.
• Também mantém a função cardiovascular regulando a produção de NO e prostaglandinas e controla a captação circadiana de glutamato nas sinapses.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 390–565 do PER2 humano; devido à conservação da sequência, pode reagir cruzadamente com o PER2 de camundongo e rato, conforme indicado. Valide a reatividade cruzada em sua espécie alvo.
• Para western blotting, o peso molecular previsto é de ~137 kDa. Use um gel de acrilamida de baixa porcentagem e otimize as condições de transferência para proteínas de alto peso molecular.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P), considere testar diferentes métodos de recuperação de antígenio e confirme a especificidade da coloração em tecidos com expressão conhecida, como músculo esquelético ou pâncreas.
• Para imuno-precipitação de cromatina (ChIP), inclua controles apropriados (por exemplo, linhagens celulares knockout ou competição com peptídeo) para verificar a especificidade do anticorpo e o enriquecimento do alvo.
• Para ELISA, o anticorpo pode servir como reagente de captura ou detecção; o pareamento com um anticorpo monoclonal específico para PER2 pode melhorar a sensibilidade e especificidade do ensaio.

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