Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Perforina para WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P14222

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Perforina

• A Perforina-1 (PRF1), também conhecida como citolisina e proteína formadora de poros em linfócitos (PFP), é uma proteína efetora chave em linfócitos citotóxicos. Referências relacionadas: PMID:20889983 PMID:21037563 PMID:24558045
• Ela desempenha um papel essencial na morte celular programada mediada por granzimas, permitindo a eliminação de células infectadas por vírus ou neoplásicas. Referências relacionadas: PMID:20889983 PMID:21037563 PMID:24558045
• Em sua forma ligada ao cálcio, a perforina se insere na membrana da célula-alvo, oligomeriza e forma grandes poros que facilitam a passagem das granzimas citotóxicas. Referências relacionadas: PMID:20889983 PMID:21037563
• A perforina promove a citólise e a apoptose ao mediar a captação de granzimas nas células-alvo. Referências relacionadas: PMID:20038786 PMID:20225066 PMID:24558045
• É importante na eliminação de células reconhecidas como não próprias, contribuindo para a rejeição de transplantes e algumas doenças autoimunes. Referências relacionadas: PMID:9058810
• Deficiências em PRF1 estão associadas à linfohistiocitose hemofagocítica familiar (FHL), um distúrbio imunológico com risco de vida.
• Subcelularmente, a perforina é armazenada em grânulos citolíticos, secretada após desgranulação e pode se associar à membrana da célula-alvo e ao lúmen do endossomo.
• Modificações pós-traducionais incluem glicosilação e ligações dissulfeto; contém um domínio semelhante a EGF e funciona como uma proteína transmembrana formadora de poros dependente de cálcio.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange a maior parte da proteína perforina madura (aa 21-555), sugerindo ampla cobertura de epítopos. Considere verificar a especificidade por meio de modelos de nocaute ou silenciamento.
• Para Western blot, espera-se uma banda em torno de 61 kDa em amostras humanas e de camundongo. Otimize as condições de carga e bloqueio conforme necessário.
• Para IHC-P e IF/ICC, inclua etapas apropriadas de permeabilização e recuperação antigênica; valide em linfócitos citotóxicos que expressam perforina (por exemplo, células NK, células T CD8+).
• A adequação para ELISA indica potencial para detecção quantitativa; combine com um par de anticorpos correspondente para o desenvolvimento de ELISA sanduíche.
• Observe a reatividade cruzada com camundongo; valide se aplicações específicas de espécies requerem testes adicionais.

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