Anticorpo Monoclonal Anti-PERK para WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - Q9NZJ5

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de PERK (EIF2AK3)

• EIF2AK3/PERK é uma quinina sensor de estresse metabólico que, após o estresse no retículo endoplasmático (RE), se autofosforila e fosforila eIF2-alfa (EIF2S1) em Ser51, atenuando a síntese global de proteínas enquanto induz a expressão gênica da resposta ao estresse integrada (ISR) mediada por ATF4. Referências relacionadas:
  PMID:10026192
  PMID:10677345
  PMID:11907036
  PMID:27917829
• O eixo PERK-ATF4 regula positivamente COX7A2L/SCAF1 para aumentar a formação de supercomplexos respiratórios mitocondriais e a fosforilação oxidativa. Referências relacionadas:
  PMID:31023583
• Nos pontos de contato entre mitocôndrias e RE, ATAD3A inibe diretamente PERK, protegendo as mitocôndrias do estresse mediado pela UPR. Referências relacionadas:
  PMID:39116259
• PERK também fosforila NRF2, provocando sua dissociação de KEAP1, acúmulo nuclear e ativação de genes antioxidantes e citoprotetores.
• PERK se localiza na membrana do retículo endoplasmático, com uma topologia transmembranar de passagem única e um domínio luminal de detecção de estresse.
• Expresso de forma ubíqua, PERK é particularmente abundante em tecidos secretores como o pâncreas, o que é consistente com seu papel na proteostase do RE.
• Estruturalmente, PERK é uma glicoproteína, sofre ADP-ribosilação e contém um domínio quinase de serina/treonina com atividade adicional de tirosina quinase.
• Mutações de perda de função em EIF2AK3 causam a síndrome de Wolcott-Rallison, caracterizada por diabetes neonatal e displasia esquelética.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange o domínio quinase C-terminal de PERK humano (resíduos 867–1116). É esperado que este anticorpo detecte os níveis totais de PERK independentemente do estado de fosforilação.
• Para Western blot, os lisados de proteínas devem ser preparados em condições redutoras; é esperada uma banda próxima a 125 kDa. A baixa expressão basal de PERK pode exigir a indução de estresse no RE com agentes como tunicamicina ou tapsigarina.
• Na imunofluorescência e imunohistoquímica, considere a co-coloração com um marcador de RE (por exemplo, Calnexina) para confirmar a localização.
• Para ELISA, considere usar proteína PERK recombinante ou lisados de células de células estressadas como sistema de captura/detecção.

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