Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-PFKFB3 (iPFK-2) para WB, IHC-P, ELISA - Q16875

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PFKFB3

• PFKFB3 também é conhecida como isoína do tipo cérebro/placenta 6PF-2-K/Fru-2,6-P2ase, iPFK-2 e antígeno de carcinoma renal NY-REN-56, destacando seu papel no metabolismo da frutose 2,6-bisfosfato.
• A enzima catalisa tanto a síntese quanto a degradação da frutose 2,6-bisfosfato, um potente ativador alostérico da fosfofrutocinase-1 e, portanto, um regulador chave da glicólise.
• PFKFB3 é uma enzima bifuncional que possui atividades tanto de quinase (6-fosfofruto-2-quinase) quanto de fosfatase (frutose-2,6-bisfosfatase), classificando-a como uma enzima multifuncional.
• Ela contém domínios de ligação a ATP e a nucleotídeos, o que é consistente com sua atividade de quinase e classificação como transferase.
• A proteína está sujeita a fosforilação, indicando controle regulatório por vias de sinalização, e foi identificada em triagens de proteômica em larga escala.
• O splicing alternativo do gene PFKFB3 gera múltiplas isoformas, refletido na faixa de peso proteico observada de 57 a 60 kDa.
• PFKFB3 é expressa de forma ubíqua em todos os tecidos humanos, ressaltando seu papel fundamental no metabolismo celular.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde a uma região peptídica conservada (aa 400–500), o que sugere que o anticorpo pode reconhecer múltiplas isoformas de PFKFB3 em amostras humanas, de camundongo e de rato. Valide a reatividade cruzada entre espécies no seu sistema de ensaio específico.
• Para Western Blot, espere bandas entre 57 e 60 kDa; considere usar condições redutoras e teste múltiplas concentrações de lisado para otimizar a relação sinal-ruído.
• Em IHC-P, métodos padrão de recuperação de antígeno (por exemplo, tampão de citrato, pH 6,0) podem ser adequados; no entanto, as condições ideais devem ser determinadas empiricamente.
• Para aplicações de ELISA, recomenda-se a realização de titulações prévias em tabuleiro de damo contra o peptídeo imunógeno ou proteína recombinante para estabelecer a faixa linear e a sensibilidade.

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