Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-PFKL para WB, IHC-P, ELISA - P17858

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PFKL

• PFKL (6-fosfofrutoquinase dependente de ATP, tipo hepática), também conhecida como PFK-B, PFK-L ou fosfohexoquinase, é uma enzima glicolítica de ~85 kDa pertencente à família das fosfofrutoquinases.
• Catalisa a fosforilação da D-frutose 6-fosfato em frutose 1,6-bisfosfato por ATP, a primeira etapa comprometedora da glicólise (PubMed:22923583). Referências relacionadas: PMID:22923583
• Regula negativamente a explosão oxidativa dos fagócitos em resposta à infecção bacteriana, controlando a biossíntese celular de NADPH; após a ativação de macrófagos, ele direciona a mudança metabólica para a glicólise, reduzindo o turnover de glicose pela via da pentose fosfato.
• Se localiza principalmente no citoplasma, o que é consistente com seu papel na glicólise.
• Funciona como uma enzima alostérica regulada por ATP e outros metabólitos; sofre modificações pós-traducionais, incluindo acetilação e fosforilação.
• O splicing alternativo produz múltiplas isoformas, e a proteína foi identificada por meio de sequenciamento direto de proteínas e análises proteômicas.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado é uma proteína de fusão recombinante correspondente à região C-terminal (aa 680–780) da PFKL humana, uma sequência conservada que provavelmente é a base da reatividade cruzada relatada com camundongo e rato.
• Para Western blotting, espera-se uma banda principal próxima a 85 kDa; considere otimizar as condições de lise da amostra e eletroforese para obter uma separação clara.
• No IHC-P, o uso de métodos apropriados de recuperação de antígeno e a validação com controles de tecido positivos e negativos conhecidos podem melhorar a especificidade da coloração.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser testado como reagente de captura ou detecção; recomenda-se testes empíricos para estabelecer os pareamentos e concentrações ideais.
• Como anticorpo monoclonal de coelho, ele oferece desempenho consistente entre lotes, o que é vantajoso para o desenvolvimento de imunoensaios reprodutíveis.

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