Anticorpo Policlonel de Coelho Anti-PFKL para WB, IF/ICC, ELISA - P17858

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PFKL

• PFKL (6-fosfofrutoquinase dependente de ATP, tipo fígado) também é conhecida como 6-fosfofrutoquinase tipo B (PFK-B) e fosfohexoquinase. Ela catalisa a fosforilação da D-frutose 6-fosfato em frutose 1,6-bisfosfato usando ATP, que é a primeira etapa irreversível da glicólise. Referências relacionadas: PMID:22923583
• Em macrófagos, a PFKL regula negativamente a explosão oxidativa dos fagócitos controlando a biossíntese de NADPH e a produção de espécies reativas de oxigênio, promovendo uma mudança metabólica para a glicólise após a ativação (Por similaridade).
• A enzima é alostérica, sujeita à regulação por vários metabólitos, e existe como homotetrâmero ou em heterotetrâmeros com outras isozimas de fosfofrutoquinase (PFKM e PFKP).
• A PFKL está predominantemente localizada no citoplasma, o que é consistente com seu papel na glicólise.
• As modificações pós-traducionais da PFKL incluem acetilação e fosforilação, que podem modular sua atividade e estabilidade.
• A proteína pertence à família das fosfofrutoquinases e é uma transferase com sítios de ligação a ATP e ao magnésio.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 700–780 da região C-terminal da PFKL humana. Verifique a especificidade do anticorpo no seu sistema de amostras usando controles apropriados.
• Para Western blot, é esperada uma banda específica em aproximadamente 85 kDa. Considere usar um marcador de peso molecular para confirmar a identidade da banda.
• A reatividade cruzada é informada para humano, camundongo e rato; valide o anticorpo nessas espécies realizando um controle específico da espécie (por exemplo, lisado de tecido).
• Para imunofluorescência/imunocitoquímica, otimize as condições de fixação e permeabilização; um padrão de coloração citoplasmático é esperado com base na localização subcelular da proteína.
• No ELISA, teste o anticorpo como reagente de captura ou detecção com PFKL recombinante ou proteína nativa de lisados celulares; determine a diluição ideal do anticorpo experimentalmente.

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