Anticorpo Policlonal Anti-PFKM para WB, IF/ICC, ELISA - P08237

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PFKM

• PFKM (6-fosfofrutoquinase dependente de ATP, tipo muscular) também é conhecida como fosfofrutoquinase-1 isoforma A (PFK-A), fosfohexoquinase, entre outros apelidos (GSD7, PFK1, PFKA, PFKX, PFK-1, PFK-A, ATP-PFK, PPP1R122). Pertence à família das fosfofrutoquinases e é a isoforma específica do músculo.
• A PFKM catalisa a fosforilação da D-frutose 6-fosfato em frutose 1,6-bisfosfato usando ATP, representando a primeira etapa irreversível e limitante da velocidade da glicólise. Essa reação compromete a glicose à produção de energia.
• A enzima está localizada no citoplasma, o que é consistente com seu papel na via glicolítica.
• A PFKM sofre múltiplas modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, fosforilação, hidroxilação e glicosilação, que podem regular sua atividade e estabilidade. Também é uma enzima alostérica que responde ao status energético celular.
• Mutações no gene PFKM estão associadas à doença de armazenamento de glicogênio tipo VII (GSD7, doença de Tarui), caracterizada por intolerância ao exercício e câimbras musculares devido à glicólise comprometida.
• O splicing alternativo gera diferentes isoformas, e a proteína foi identificada por meio de estudos de proteômica em larga escala como parte do proteoma de referência.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um fragmento de proteína recombinante que cobre os aminoácidos 501-780, uma região que pode conferir especificidade à isoforma; verifique a reatividade cruzada com outras isoformas de PFK, se necessário.
• Para Western blot (WB), o peso molecular previsto é de aproximadamente 85 kDa; use uma porcentagem de gel e condições de transferência adequadas.
• Em imunofluorescência/imunocitoquímica (IF/ICC), confirme a localização no citoplasma de linhagens celulares musculares ou com atividade glicolítica; inclua controles adequados para a especificidade do sinal.
• Aplicações em ELISA podem exigir otimização das condições de revestimento e detecção; a natureza policlonal do anticorpo pode auxiliar na detecção sensível.
• Este anticorpo tem reatividade cruzada com PFKM humana, de camundongo e de rato, sendo adequado para estudos multiespécies; valide no seu sistema de amostra específico.

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