Anticorpo Policlonais Anti-PGP9.5/UCHL1 para WB, ELISA - P09936

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de PGP9.5/UCHL1

• PGP9.5/UCHL1, também conhecido como proteína citoplasmática neuronal 9.5 ou ubiquitin tioesterase L1, é um membro da família das ubiquitin carboxi-terminal hidrolases, funcionando como uma desubiquitinase essencial para a manutenção do sistema ubiquitina-proteassoma.

• Ela reconhece e hidrolisa especificamente a glicina C-terminal da ubiquitina, preservando assim um pool estável de monoubiquitina livre, que é crítica para as vias de degradação ubiquitina-proteassoma e autofagia-lisossoma.
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• UCHL1 participa de diversos processos fisiológicos, incluindo a manutenção da função sináptica, função cardíaca, regulação de respostas inflamatórias e osteoclastogênese.
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• A enzima desubiquitina e estabiliza múltiplas proteínas substrato, como WWTR1/TAZ, EGFR, HIF1A e BACE1, modulando assim as vias de sinalização envolvidas no crescimento celular, resposta à hipóxia e neurodegeneração.
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• Através de sua ação sobre BACE1, UCHL1 promove a degradação da beta-site amyloid precursor protein cleaving enzyme 1, levando à redução da produção de peptídeos beta amiloide — uma característica da patologia da doença de Alzheimer.
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• Subcelularmente, UCHL1 se localiza predominantemente no citoplasma e também é encontrada associada à membrana do retículo endoplasmático.

• A expressão tecidual é mais alta em neurônios, com a proteína detectada em corpos celulares e processos em todo o neocórtex; ela também está presente em células do sistema neuroendócrino difuso e seus tumores, mas apenas fracamente no ovário. Notavelmente, os níveis de UCHL1 são regulados negativamente em tecidos cerebrais de pacientes com doença de Parkinson e doença de Alzheimer.

• As modificações pós-tradução incluem acetilação, fosforilação, oxidação e prenilação, e variantes genéticas foram associadas à paraplegia espástica hereditária, doença de Parkinson e outros distúrbios neurodegenerativos.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para detecção por Western blot, espera-se uma banda de aproximadamente 25 kDa; no entanto, devido a possíveis modificações pós-tradução e agregação proteica, o peso molecular observado pode variar.

• Lisados de tecido cerebral humano ou linhagens de células de neuroblastoma (por exemplo, SH-SY5Y) podem servir como controles positivos, dada a expressão neuronal de UCHL1; amostras de cérebro de camundongo também podem ser usadas para confirmar a reatividade cruzada.

• Para aplicações de ELISA, deve-se considerar a cobertura com o imunógeno recombinante (aa 59-223) como padrão e incluir controles negativos apropriados para avaliar a especificidade.

• Como este é um anticorpo policlonal produzido contra uma proteína de fusão recombinante, a consistência entre lotes deve ser verificada e etapas de pré-absorção podem ajudar a reduzir a ligação não específica, se necessário.

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