Anticorpo Monoclonal Anti-PHF8 para WB, ELISA - Q9UPP1

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PHF8

• PHF8 (KDM7B/JHDM1F/ZNF422) é uma desmetilase de lisina de histona que remove preferencialmente marcas mono e dimetil de H3K9 e H4K20, convertendo a cromatina repressiva em um estado ativo. Referências relacionadas: PMID:20101266, PMID:20208542, PMID:20346720
• É crucial para a progressão do ciclo celular, controlando a transição G1-S, e para a transcrição do DNA ribossomal como um coativador da RNA polimerase I. Referências relacionadas: PMID:20622854, PMID:20531378
• A atividade desmetilase em direção a H3K9me2 é fortemente estimulada pela ligação à H3K4 trimetilada (H3K4me3), fornecendo uma leitura da cromatina ativa. Referências relacionadas: PMID:20023638, PMID:20346720, PMID:20421419
• A PHF8 sinergiza com o fator de transcrição ARX para regular positivamente a KDM5C, promovendo o enriquecimento de H3K4me3 em elementos regulatórios. Referências relacionadas: PMID:31691806
• A proteína está localizada no núcleo e no nucléolo, de acordo com seus papéis regulatórios na cromatina e no rDNA.
• Possui um dedo PHD que se liga a H3K4me3, um domínio catalítico JmjC e um domínio de dedo de zinco (ZNF422), classificando-a como um regulador de cromatina.
• Necessária para o desenvolvimento normal do cérebro; mutações de perda de função estão ligadas à deficiência intelectual ligada ao X (MRXSSD).

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado é um peptídeo sintético correspondente aos aminoácidos 800-900 da PHF8 humana, sugerindo que o anticorpo pode reconhecer a região C-terminal da proteína.
• Para Western blot, a PHF8 tem um peso molecular previsto de aproximadamente 118 kDa; garanta a porcentagem de gel adequada e condições de transferência para proteínas de alto peso molecular.
• Dada sua localização nuclear, extração nuclear ou lisados de células inteiras são recomendados para detecção; considere validar em linhagens celulares humanas e de camundongo que expressam PHF8 (por exemplo, HeLa, HEK293, fibroblastos embrionários de camundongo).
• Para ELISA, o formato direto ou sanduíche pode ser usado; é aconselhável a otimização do antígeno de revestimento e da concentração de anticorpo.
• Como um modificador de histona com expressão dependente do ciclo celular, a intensidade do sinal pode variar; inclua controles de carga apropriados e normalize para o número de células ou proteína total.

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