Anticorpo Policlonal Anti-PHKA1 para WB, ELISA - P46020

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PHKA1

• O PHKA1 codifica a subunidade alfa reguladora da fosforilase b quinase (PhK), um complexo que ativa a fosforilase de glicogênio para iniciar a quebra do glicogênio.
• O splicing alternativo gera pelo menos duas isoformas: a isoforma 1 é predominante no músculo esquelético (por exemplo, vasto lateral), enquanto a isoforma 2 predomina ligeiramente no coração e claramente em outros tecidos.
• Acredita-se que a subunidade alfa se liga à calmodulina, integrando a sinalização de cálcio com a glicogenólise, e a PhK fosforila resíduos de serina em substratos como a troponina I.
• Estudos de localização subcelular situam esta subunidade reguladora na membrana celular, sugerindo um papel em complexos enzimáticos associados à membrana.
• Mutações no PHKA1 são uma causa da doença de armazenamento de glicogênio tipo IX (GSD IX), um distúrbio metabólico caracterizado por metabolismo de glicogênio prejudicado, afetando principalmente o músculo esquelético.
• A proteína sofre modificações pós-traducionais, incluindo prenilação (daí sua associação com membranas) e fosforilação, que podem regular sua atividade.
• A estrutura tridimensional da proteína foi resolvida, oferecendo insights em nível atômico sobre a organização de seus domínios e interfaces regulatórias potenciais.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aminoácidos 600–820) abrange uma região C-terminal do PHKA1 humano; verifique a especificidade do anticorpo usando controles positivos e negativos apropriados (por exemplo, lisados de knockout de PHKA1) para sua aplicação.
• Para Western blotting, as diluições de trabalho típicas para anticorpos policlonais de coelho variam de 1:500 a 1:5000; a concentração ideal deve ser determinada empiricamente com base no tipo de amostra e no sistema de detecção.
• Em ensaios de ELISA, este anticorpo pode servir como reagente de captura ou detecção; as condições do ensaio (concentração de revestimento, agente de bloqueio, tempos de incubação) exigem otimização pelo usuário final.
• O anticorpo é validado com amostras humanas e de camundongo. Para outras espécies, avalie a homologia da sequência da região do imunógeno e realize western blots piloto antes de experimentos em grande escala.
• O envio em sacos com gelo pode expor o anticorpo a flutuações leves de temperatura; ao recebê-lo, alíquota e armazene a -20 °C ou -80 °C, evitando ciclos repetidos de congelamento-descongelamento para manter a estabilidade a longo prazo.

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