Anticorpo Policlonal Anti-PHLPP2 para WB, IF/ICC, ELISA - Q6ZVD8

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da PHLPP2

• A PHLPP2 (fosfatase 2 contendo repetição rica em leucina e domínio PH), também conhecida como PHLPPL ou PPM3B, é membro da família de fosfatases PHLPP que regulam a sinalização das cinases AGC.
• Desfosforila resíduos-chave de serina no motivo hidrofóbico das cinases AGC, incluindo Akt1 (Ser-473), PRKCB (Ser-660) e PRKCA (Ser-657), inativando assim estas cinases e promovendo a apoptose ou reduzindo a proliferação.
• A PHLPP2 funciona como supressora tumoral, e a sua expressão está diminuída em muitos cancros, incluindo o cancro colorretal, onde está ausente em cerca de 80% dos tumores (ao nível da proteína).
• Além disso, a PHLPP2 desfosforila e ativa a STK4 (MST1) em Thr-387, levando à apoptose. Referências relacionadas: PMID:20513427
• Desfosforila a RPS6KB1 (S6K1), regulando a tradução dependente do cap. Referências relacionadas: PMID:21986499
• A PHLPP2 também desfosforila a RAF1, inibindo a sua atividade cinase e modulando, assim, a via MAPK/ERK. Referências relacionadas: PMID:24530606
• A nível subcelular, a PHLPP2 localiza-se no citoplasma, na membrana e no núcleo, em concordância com as suas funções em vários compartimentos de sinalização.
• A proteína contém repetições ricas em leucina e um domínio PH, importantes para as interações proteína-proteína e para o direcionamento à membrana.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunogénio corresponde a uma região C-terminal (aminoácidos 1250-1323) da PHLPP2 humana; considere utilizar um péptido bloqueador para confirmar a especificidade do anticorpo nos ensaios relevantes.
• Para a transferência Western (WB), o peso molecular previsto da PHLPP2 é de aproximadamente 147 kDa; utilize uma percentagem de gel adequada (por exemplo, SDS-PAGE a 6-8%) e assegure condições de transferência adequadas para proteínas de elevado peso molecular.
• Na imunofluorescência/imunocitoquímica (IF/ICC), a PHLPP2 apresenta localização citoplasmática, membranar e nuclear; otimize os protocolos de fixação e permeabilização para cada compartimento.
• Para ELISA, titule o anticorpo contra o péptido imunogénico ou a proteína recombinante para determinar a concentração de trabalho ideal para a deteção.

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