Anticorpo Monoclonal Anti-Fosfo-AKT1-S473 para WB, IHC-P, ELISA - P31749

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Serina/treonina-proteína quinase RAC-alfa (AKT1)

• AKT1 é uma serina/treonina-proteína quinase que regula o metabolismo, proliferação, sobrevivência celular, crescimento e angiogênese por meio da fosforilação de substratos downstream. Referências relacionadas: PMID:11882383, PMID:15526160, PMID:15861136
• Ela fosforila TBC1D4 para promover o transporte de glicose estimulado pela insulina. Referências relacionadas: PMID:11994271
• Por meio da fosforilação de TSC2, AKT1 ativa a via de sinalização mTORC1, aumentando a síntese de proteínas. Referências relacionadas: PMID:12150915, PMID:12172553
• AKT1 promove a sobrevivência celular fosforilando MAP3K5/ASK1 em Ser-83 para inibir a apoptose induzida por estresse oxidativo. Referências relacionadas: PMID:11154276
• Ela fosforila fatores de transcrição FOXO (FOXO1, FOXO3, FOXO4) para excluí-los do núcleo, suprimindo a expressão de genes pró-apoptóticos. Referências relacionadas: PMID:10358075
• A localização subcelular inclui citoplasma, núcleo, membrana celular e espaço intermembranar mitocondrial, refletindo seus diversos papéis de sinalização.
• AKT1 é expressa em todos os tipos de células humanas, com níveis elevados em câncer de próstata e de mama, e a forma fosforilada em Ser473 está associada à progressão do câncer.
• As principais modificações pós-traducionais incluem fosforilação em Ser473 e Thr308 para ativação completa, além de acetilação e glicosilação.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Este anticorpo foi produzido contra um fosfopeptídeo sintético ao redor de Ser473 da Akt1 humana. O desenho do imunógeno visa a forma ativada de Akt1; Akt1 não fosforilada pode não ser detectada.
• Para Western blot (WB), considere o uso de inibidores de fosfatase durante a preparação da amostra para preservar os estados de fosforilação. O peso molecular previsto é de 56 kDa (P31749).
• Para imuno-histoquímica (IHC-P), as condições de recuperação de antígeno e a fixação do tecido podem influenciar a detecção do fosfo-epítopo; valide em tecidos controle positivo conhecidos (ex.: espécimes de câncer).
• Para ELISA, certifique-se de que as condições de revestimento preservem o fosfo-epítopo; o anticorpo pode ser usado em combinação com um anticorpo de detecção de Akt1 total para análise da razão fosfo/total.
• A reatividade cruzada com Akt1 de camundongo e rato é esperada com base na homologia de sequência; diferenças na acessibilidade do sítio fosforilado podem exigir validação específica por espécie.

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