Anticorpo policlonal de coelho Anti-Fosfo-AKT1-T308 para WB, IHC-P, ELISA - P31749

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da AKT1

• AKT1 é um membro da família de quinases de serina/treonina AKT (AKT1, AKT2, AKT3) que regula inúmeros processos celulares, incluindo metabolismo, proliferação, sobrevivência celular, crescimento e angiogênese. Referências relacionadas: PMID:11882383 PMID:15526160 PMID:15861136
• Atua na via de sinalização a jusante do PI3K para mediar os efeitos da insulina, IGF1 e fatores de crescimento como PDGF e EGF. Referências relacionadas: PMID:12176338 PMID:12964941
• Fosforila TSC2 em Ser-939 e Thr-1462, levando à ativação de mTORC1 e aumento da síntese proteica. Referências relacionadas: PMID:12150915 PMID:12172553
• Fosforila e inibe MAP3K5, promovendo a sobrevivência celular em condições de estresse oxidativo. Referências relacionadas: PMID:11154276
• Fosforila fatores de transcrição FOXO (por exemplo, FOXO1 em Thr-24, Ser-256, Ser-319), levando à sua retenção citoplasmática e à supressão da expressão de genes pró-apoptóticos. Referências relacionadas: PMID:10358075
• Fosforila BAD, suprimindo assim sua atividade pró-apoptótica. Referências relacionadas: PMID:10926925
• Se localiza no citoplasma, núcleo, membrana celular e espaço intermitocondrial, permitindo diversos papéis na sinalização celular.
• É amplamente expressa em tecidos humanos; níveis elevados da proteína são observados na progressão do câncer de próstata e de mama.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é direcionado ao sítio de fosforilação em Thr-308, um resíduo crítico da alça de ativação da AKT1. Para detecção total de AKT1, considere um anticorpo pan-AKT separado.
• No WB, a banda esperada migra em torno de 56 kDa. Valide o status de fosforilação tratando as células com estímulos como insulina ou fatores de crescimento; inclua inibidores de fosfatase durante a lise.
• Para IHC-P, a recuperação de antígeno pode ser necessária. Use o bloqueio com peptídeo fosforilado e seções de tecido com status conhecido de ativação de AKT1 como controles.
• Aplicações em ELISA devem ser otimizadas por titulação em tabuleiro de xadrez; confirme a especificidade com peptídeos fosforilados e não fosforilados.
• A reatividade cruzada com AKT1 de camundongo e rato está confirmada; verifique a homologia de sequência no epítopo se estudar outras espécies.

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