Anti-Fosfo-AKT1 (Thr450) Anticorpo Policlonal de Coelho para WB, ELISA - P31749

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da AKT1

• A AKT1 é o membro fundador da família de quinases serina/treonina AKT, que também inclui AKT2 e AKT3, e governa processos fundamentais como metabolismo, proliferação, sobrevivência, crescimento e angiogênese (PubMed:11882383, PubMed:15526160, PubMed:15861136). Referências relacionadas: PMID:11882383, PMID:15526160, PMID:15861136
• Na cascata de sinalização da insulina, a AKT1 fosforila TBC1D4 para promover a translocação de GLUT4 e a captação de glicose (PubMed:11994271) e inibe GSK3 para impulsionar a síntese de glicogênio. Referências relacionadas: PMID:11994271
• A AKT1 suporta a sobrevivência celular fosforilando e inativando diretamente proteínas pró-apoptóticas como MAP3K5/ASK1 (PubMed:11154276) e BAD (PubMed:10926925), e causando a retenção citoplasmática de fatores de transcrição FOXO (PubMed:10358075). Referências relacionadas: PMID:11154276, PMID:10926925, PMID:10358075
• Através da fosforilação de TSC2, a AKT1 ativa mTORC1, acoplando sinais de fatores de crescimento à síntese proteica, biogênese de ribossomos e crescimento celular (PubMed:12150915, PubMed:12172553). Referências relacionadas: PMID:12150915, PMID:12172553
• A AKT1 transita entre o citoplasma, núcleo, membrana plasmática e espaço intermembranral mitocondrial; essa localização dinâmica é essencial para acessar alvos a jusante distintos.
• Amplamente expressa em tecidos humanos, os níveis de proteína AKT1 e fosforilações de ativação são frequentemente elevados em cânceres, incluindo malignidades de próstata e mama, onde se correlacionam com a progressão do tumor.
• A AKT1 está sujeita a extensa regulação pós-traducional: a fosforilação em Thr308 e Ser473 é necessária para a atividade completa da quinase, enquanto a acetilação, ubiquitinação e glicosilação modulam ainda mais sua estabilidade e função.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blot (WB), prepare lisados de células ou tecidos com inibidores de fosfatases para preservar o sinal de fosfo-Thr450; uma banda específica próxima a 56 kDa é esperada em amostras humanas e de camundongos.
• Em aplicações de ELISA, um fosfo-peptídeo correspondente ao imunógeno pode ser usado como antígeno de revestimento para capturar o anticorpo; os usuários devem otimizar as concentrações de revestimento e as diluições do anticorpo para seu ensaio específico.
• Como os anticorpos policlonais podem exibir variabilidade de lote para lote, recomenda-se a inclusão de controles positivos e negativos apropriados (por exemplo, lisados tratados com fosfatase).
• Este anticorpo destina-se ao uso de pesquisa na detecção de fosforilação de AKT1; a validação na matriz de amostras e no sistema de ensaio do usuário final é essencial para resultados confiáveis.

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