Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Fosfo-AMPKa1/AMPKa2-T183/T172 para WB, ELISA - Q13131 / P54646

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da AMPKa1/AMPKa2

• A proteína quinase ativada por 5'-AMP (AMPK) é uma quinase de serina/treonina heterotrimérica que atua como um sensor de energia, mantendo a homeostase energética celular. As subunidades catalíticas α (α1 codificada por PRKAA1 e α2 por PRKAA2) são ativadas upon fosforilação em Thr-183 (α1) ou Thr-172 (α2) em resposta ao aumento de AMP/ADP e quinases a montante. Referências relacionadas: PMID:17307971, PMID:17712357

• A AMPK regula o metabolismo lipídico fosforilando a acetil-CoA carboxilase (ACACA/ACACB) e a redutase HMG-CoA, inibindo assim a síntese de ácidos graxos e colesterol. Também promove a lipólise através da fosforilação da lipase sensível a hormônios (LIPE).

• Na homeostase da glicose, a AMPK aumenta a captação de glicose muscular promovendo a translocação de SLC2A4/GLUT4 e modula a gliconeogênese hepática via fosforilação de CRTC2/TORC2. Também regula as enzimas glicolíticas PFKFB2/3.

• A AMPK controla o crescimento e a proliferação celular inibindo a via mTORC1 através da fosforilação de TSC2 e RPTOR, e fosforilando FNIP1 para suprimir a sinalização não canônica do mTORC1, promovendo assim a autofagia via ativação de ULK1. Referências relacionadas: PMID:14651849, PMID:18439900, PMID:20160076, PMID:21205641, PMID:37079666

• A quinase fosforila múltiplos fatores de transcrição e co-reguladores (por exemplo, FOXO3, p53, SREBF1/2, HNF4A, CRTC2, HDAC5, MEF2C, PPARGC1A, EP300) para exercer respostas metabólicas e de estresse de longo prazo, e medeia a regulação da cromatina via fosforilação da histona H2B. Referências relacionadas: PMID:11518699, PMID:11554766, PMID:15866171

• A localização subcelular inclui citoplasma, núcleo e endossomos tardios, permitindo que a AMPK coordene programas metabólicos e transcricionais entre compartimentos. Também está envolvida no início da autofagia e na dinâmica mitocondrial. Referências relacionadas: PMID:34077757, PMID:36367943

• Funções adicionais incluem a regulação do ritmo circadiano via fosforilação de CRY1, sinalização Wnt através da estabilização de CTNNB1 e atividade de quinase da proteína tau sob exposição a beta-amiloide. A AMPKα1 também está implicada em respostas de ferroptose e hipóxia através da fosforilação de ALDH7A1. Referências relacionadas: PMID:31492851, PMID:40233740

• A AMPKα1 sofre splicing alternativo e é modificada por conjugação tipo ubiquitina (Ubl). A proteína é uma glicoproteína e fosfoproteína, com atividade de quinase dependente de metal requerendo magnésio.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O anticorpo foi produzido contra um fosfopeptídeo sintético circundante ao Thr-183 da AMPKα1/α2 humana; verificar a especificidade fosfo-específica através do tratamento de lisados celulares com λ-fosfatase ou competição peptídica é aconselhável.
• Para Western blotting, espera-se uma banda em aproximadamente 64–65 kDa (α1) e 62 kDa (α2). Múltiplas bandas podem surgir a partir de variações de isoformas e estados de fosforilação; use controles negativos apropriados (bloqueio com peptídeo não fosforilado) para confirmar a especificidade do sinal.
• Este anticorpo é adequado para ensaio imunossorvente ligado a enzima (ELISA); considere o emparelhamento com um anticorpo total de AMPKα para normalizar sinais de fosfo em abordagens quantitativas.
• Devido à alta conservação de sequência, a reatividade cruzada com AMPKα de camundongo e rato é relatada; valide na espécie e contexto de tecido relevantes.

CamelBio: Sua Ponte de Aquisição Tudo-em-Um

A CamelBio fornece aos fabricantes de diagnósticos e institutos de pesquisa um canal simplificado para adquirir matérias-primas de IVD premium, incluindo este anticorpo fosfo-AMPKα1/α2 para pesquisa de metabolismo energético. Nosso portfólio cobre pares de anticorpos validados, anticorpos monoclonais e policlonais otimizados, reagentes auxiliares a granel e suporte para aquisição de alvos raros. Estamos dedicados a simplificar sua cadeia de suprimentos do conceito à clínica.