Anticorpo Policlonico de Coelho Anti-Fosfo-ATM (S1981) para WB e ELISA - Q13315

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do ATM

• ATM é uma proteína quinase de serina/treonina que atua como um sensor chave de danos ao DNA, ativando a sinalização do checkpoint em resposta a quebras de fita dupla (DSBs) e estresses genotóxicos (PMID:10550055, PMID:10839545, PMID:10910365).
  Referências relacionadas:
  PMID:10550055, PMID:10839545, PMID:10910365

• Ele reconhece o motivo de consenso [ST]-Q e fosforila inúmeros alvos downstream, incluindo p53/TP53, CHEK2, BRCA1 e outros, para orquestrar o reparo do DNA e a parada do ciclo celular (PMID:10550055, PMID:10766245, PMID:10802669).
  Referências relacionadas:
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• Um passo inicial crítico na sinalização de DSB é a fosforilação mediada pelo ATM da histona H2AX em Ser139, marcando a cromatina adjacente aos locais de quebra (Por similaridade).

• O ATM também atua na exclusão alélica de células pré-B, no desenvolvimento de linfócitos T e na transdução de sinal, sendo considerado um supressor de tumor.

• A quinase se localiza no núcleo, mas também em vesículas citoplasmáticas, no centrossomo e nos peroxissomos, onde fosforila o PEX5 para promover apexofagia em resposta a espécies reativas de oxigênio (ROS) (PMID:26344566).
  Referências relacionadas:
  PMID:26344566

• O ATM fosforila o ERCC6 para facilitar a remodelação da cromatina nas quebras de fita dupla do DNA (PMID:29203878), e fosforila o TTC5/STRAP em Ser203 para promover sua translocação nuclear após o dano ao DNA (PMID:15448695).
  Referências relacionadas:
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• A fosforilação do DYRK2 pelo ATM em locais nucleares protege o DYRK2 da ubiquitinação mediada por MDM2 e da degradação proteassômica após o estresse genotóxico (PMID:19965871).
  Referências relacionadas:
  PMID:19965871

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Este anticorpo foi produzido contra um fosfopepetídeo sintético correspondente ao sítio de fosforilação S1981 do ATM humano; é esperada especificidade apenas para a forma fosforilada.
• Para Western blotting, inclua inibidores de fosfatase nos tampões de lise e lavagem para preservar a fosforilação. Considere verificar a fosfo-especificidade tratando as amostras com proteína fosfatase lambda ou realizando experimentos de bloqueio com peptídeo.
• Devido ao grande tamanho do ATM (~351 kDa), use um gel de acrilamida de baixa porcentagem (ex: 6%) e tempos de transferência estendidos. Um gel de gradiente (4-15%) também pode melhorar a separação.
• Valide o anticorpo no seu sistema de modelo específico; a reação cruzada com camundongo é reportada, mas o desempenho em outras espécies deve ser testado individualmente.
• Para ELISA, confira as condições de revestimento e detecção, pois anticorpos fosfo-específicos podem exigir pH de tampão e reagentes de bloqueio otimizados.

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