Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Fosfo-BRCA1 (S988) para IHC-P, IF/ICC, ELISA - P38398

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do BRCA1

• A proteína de suscetibilidade ao câncer de mama tipo 1 (BRCA1), também conhecida como proteína 53 com dedo RING (RNF53), é uma ligase E3 de ubiquitina-proteína que medeia especificamente a formação de cadeias poliubiquitina ligadas a 'Lis-6', desempenhando um papel central nas respostas celulares aos danos no DNA. Referências relacionadas: PMID:10500182 PMID:12887909 PMID:12890688
• O heterodímero BRCA1-BARD1 coordena diversas vias, incluindo reparo de DNA, ubiquitinação e regulação transcricional, para manter a estabilidade genômica. Referências relacionadas: PMID:12890688 PMID:14976165 PMID:20351172
• O BRCA1 é necessário para prisões apropriadas do ciclo celular após irradiação ionizante tanto na fase S quanto na fase G2, e contribui para o reparo por recombinação homóloga (HRR) via interação com PALB2 e ajuste fino do carregamento de BRCA2-RAD51 nas quebras de DNA. Referências relacionadas: PMID:10724175 PMID:11836499 PMID:12183412 PMID:19369211
• Regula a nucleação de microtúbulos centrossomais e inibe a síntese de lipídios ligando-se à ACACA fosforilada inativa, impedindo sua desfosforilação. Referências relacionadas: PMID:18056443 PMID:16326698
• O complexo BRCA1-RBBP8 controla a ativação do ponto de verificação G2/M via ubiquitinação do RBBP8, ilustrando um mecanismo regulatório direto na progressão do ciclo celular após danos no DNA. Referências relacionadas: PMID:16818604
• A localização subcelular inclui núcleo, cromossomo e citoplasma, com trânsito dinâmico dependendo do estágio do ciclo celular e sinais de dano no DNA.
• Modificações pós-traducionais incluem fosforilação (por exemplo, em S988), acetilação e ubiquitinação, que modulam sua atividade e interações.
• As isoformas 1 e 3 são amplamente expressas; a isoforma 3 é frequentemente reduzida ou ausente em linhagens celulares de câncer de mama e ovário.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um fosfopeptídeo sintético em torno da S988 do BRCA1 humano; a especificidade do anticorpo para a forma fosforilada deve ser confirmada por tratamento com fosfatase ou ensaios de competição.
• Para IHC-P, otimize a recuperação de antígenio e considere o uso de tecidos com expressão conhecida de BRCA1 (por exemplo, mama, ovário); inclua um controle negativo usando um peptídeo bloqueador não fosforilado.
• Em IF/ICC, a coloração simultânea com marcadores de dano no DNA ou marcadores de fase do ciclo celular pode fornecer contexto funcional para a localização do BRCA1.
• A detecção por ELISA de fosfo-BRCA1 pode requerer extração cuidadosa e normalização para os níveis totais de BRCA1; valide a linearidade e sensibilidade na matriz de amostras relevante.

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