Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Fosfo-c-Myc (S62) para WB, IHC-P e ELISA - P01106

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Proteína do Proto-oncogene Myc

• MYC (c-Myc) é um proto-oncogene e fator de transcrição bem conhecido, também designado como proteína 39 de hélice-alça-hélice básica da classe E (bHLHe39) ou fator de transcrição p64. É codificado pelo gene MYC e está intimamente associado ao crescimento celular, proliferação e oncogênese.
• Como um fator de transcrição específico de sequência, o MYC liga-se ao motivo E-box canônico 5'-CACGTG-3' para ativar a transcrição de inúmeros genes relacionados ao crescimento, impulsionando assim a progressão do ciclo celular e a proliferação celular.
  Referências relacionadas:
  PMID:24940000 PMID:25956029
• O MYC aumenta a expressão de VEGFA ligando-se diretamente ao seu promotor, promovendo assim a angiogênese de brotação em contextos fisiológicos e patológicos.
  Referências relacionadas:
  PMID:24940000 PMID:25956029
• Em células-tronco embrionárias, o MYC funciona como um regulador chave da reprogramação somática e da autorrenovação, cooperando com a TAF6L para facilitar a liberação da pausa da RNA polimerase II e a ativação de genes alvo (por similaridade).
• O MYC regula positivamente a expressão de HNRNPA1, HNRNPA2 e PTBP1, que coletivamente modulam o splicing alternativo do pré-mRNA da piruvato quinase PKM, favorecendo a produção do isoforma PKM M2. Este mecanismo é crucial para a reprogramação metabólica observada em muitos cânceres.
  Referências relacionadas:
  PMID:20010808
• Subcelularmente, o MYC localiza-se predominantemente no núcleo — especificamente no nucleoplasma e no nucléolo — mas também pode transitar para o citoplasma e associar-se aos cromossomos, refletindo seu papel dinâmico na regulação transcricional e na dinâmica da cromatina.
• A proteína está sujeita a extensas modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação em múltiplos resíduos de serina e treonina (como S62), acetilação, O-glicosilação e ubiquitinação. Essas modificações regulam estritamente a estabilidade, atividade e interatoma da proteína MYC.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo é produzido contra um imunógeno específico para fosfo (peptídeo c-Myc humano fosforilado em Ser62). Para o western blot (WB), recomenda-se preparar lisados de células ou tecidos com inibidores de fosfatases e validar a especificidade para fosfo usando tratamento com λ-fosfatase ou peptídeo não fosforilado competidor.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P), aconselham-se as etapas padrão de recuperação de antígeno e bloqueio, e o anticorpo pode ser testado em várias diluições para otimizar a relação sinal-ruído.
• Em ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção; no entanto, é necessária a otimização individual do ensaio, e a reatividade cruzada com c-Myc não fosforilado deve ser avaliada.
• Dado o peso proteico previsto de aproximadamente 51 kDa, use um marcador de peso molecular apropriado e confirme a banda correta no sistema de amostra relevante (por exemplo, linhagens de células humanas, de camundongo ou de rato).
• Considere o uso deste anticorpo em combinação com anticorpos anti-c-Myc total para avaliar o estado de fosforilação em estudos de sinalização (por exemplo, via MAPK/ERK).

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