Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Fosfo-Camk2-T286 para WB - Q13554 / Q13557 / Q13555 / Q9UQM7

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Camk2 (CaMKII)

• A CaMKII é uma serina/treonina-proteína quinase que funciona como um complexo holoenzimático, com a subunidade beta (CAMK2B) desempenhando um papel fundamental no desenvolvimento neuronal e plasticidade (PubMed:16690701, PubMed:29100089). Referências relacionadas: PMID:16690701, PMID:29100089
• Em neurônios, a CaMKII beta exibe uma função estrutural independente de quinase, ligando e agrupando filamentos de actina, essencial para a morfogênese da espinha dendrítica e plasticidade sináptica (PubMed:29100089). Referências relacionadas: PMID:29100089
• A autofosforilação da CaMKII (incluindo em Thr286 em muitas isoformas) após a ligação de Ca2+/calmodulina gera atividade de quinase autônoma independente de Ca2+, crítica para a potenciação de longo prazo (LTP) e aprendizado dependente do hipocampo (PubMed:16690701, PubMed:29100089). Referências relacionadas: PMID:16690701, PMID:29100089
• No músculo esquelético, a CaMKII beta regula o transporte de Ca2+ do retículo sarcoplasmático fosforilando triadina e fosfolambana, modulando a função muscular em resposta ao exercício (PubMed:16690701). Referências relacionadas: PMID:16690701
• Sob estresse do RE, a CaMKII beta fosforila o regulador de reticulofagia RETREG1 em Ser-151, promovendo sua oligomerização e atividade de cisão de membrana para reticulofagia (PubMed:31930741). Referências relacionadas: PMID:31930741
• A proteína se localiza em múltiplos compartimentos celulares, incluindo citoplasma, citoesqueleto, centrossomo, membrana do retículo sarcoplasmático e sinapses, refletindo seus diversos papéis.
• A CaMKII beta é amplamente expressa, com altos níveis no cérebro adulto e fetal e no músculo esquelético, consistente com suas funções na neurogênese e fisiologia muscular.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo fosfo-sintético em torno de T286 da Camk2 humana; este sítio é conservado entre as isoformas CAMK2A/B/G/D e no camundongo, suportando a reatividade cruzada observada. Considere validar o anticorpo em lisados de cérebro ou músculo de camundongo.
• Para western blot, espere uma banda em aproximadamente 54 kDa correspondente à Camk2 fosforilada. Inclua controles de carga apropriados e, se possível, uma amostra tratada com fosfatase para confirmar a especificidade da fosforilação.
• No ELISA, use o peptídeo fosforilado como antígeno de revestimento e o peptídeo não fosforilado correspondente como controle negativo para avaliar a especificidade.
• Como o anticorpo reconhece uma fosforilação dependente de ativação, otimize as condições de estimulação (por exemplo, tratamento com ionóforo de Ca2+ ou neurotransmissor) para detecção robusta em modelos celulares.
• Determine a diluição de trabalho ideal para cada aplicação experimentalmente; as diluições iniciais recomendadas são tipicamente 1:500–1:2000 para WB.

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