Anti-Phospho-CBL-Y774 Coelho pAb - P22681

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da CBL

• CBL (proto-oncogene casitas B-lineage lymphoma) é uma ubiquitina-proteína ligase E3 do tipo RING que atua como regulador negativo de diversas vias de sinalização, mediando a ubiquitinação de receptores de superfície celular e cinases associadas, levando à sua degradação proteassômica (PubMed:10514377, 11896602, 14661060, 14739300, 15190072, 18374639, 21596750). Referências relacionadas: PMID:10514377 PMID:11896602 PMID:14661060 PMID:14739300 PMID:15190072 PMID:18374639 PMID:21596750

• Substratos específicos da CBL incluem cinases de receptor de tirosina (ex.: EGFR, KIT, PDGFR), cinases da família SRC, SPRY2 e receptores imunológicos como o LAG3, cuja ubiquitinação modula a sinalização a jusante ou a ordenação celular (PubMed:17094949, 17974561, 40101708, 28381567). Referências relacionadas: PMID:17094949 PMID:17974561 PMID:40101708 PMID:28381567

• A CBL desempenha um papel crítico na sinalização hematopoiética e é essencial para a diferenciação de osteoclastos e a reabsorção óssea. A fosforilação na Tyr-731 promove o recrutamento de PI3K e é necessária para a função dos osteoclastos (PubMed:14739300). Referências relacionadas: PMID:14739300

• A proteína está localizada no citoplasma, membrana celular, cílios e aparelho de Golgi, o que é consistente com seu papel no tráfego endocítico e na terminação de sinal na membrana plasmática.

• A CBL contém um domínio de ligação a tirosina-cinase N-terminal conservado, um domínio de dedo RING responsável pela sua atividade de ligase E3 e uma região C-terminal rica em prolina com vários sítios de fosforilação, incluindo a Tyr-774.

• Este anticorpo reconhece especificamente a CBL fosforilada na Tyr-774, uma modificação que provavelmente influencia as interações proteína-proteína e a dinâmica da transdução de sinal.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo fosforilado sintético que envolve a Tyr-774; o anticorpo pode detectar preferencialmente a CBL ativada em amostras competentes para sinalização. Para Western blot (WB), considere usar inibidores de fosfatase durante a lise celular e validar a especificidade com um bloqueio de peptídeo não fosforilado ou tratamento de desfosforilação.
• Para ELISA, a CBL fosforilada pode ser capturada a partir de extratos celulares em condições não desnaturantes; o pareamento com um anticorpo anti-CBL total pode permitir a análise ratiométrica de proteínas fosforiladas.
• Como anticorpo policlonal de coelho, pode apresentar variação entre lotes; valide cada novo lote no sistema experimental relevante. Armazene as alíquotas a -20°C ou -80°C para evitar ciclos repetidos de congelamento-descongelamento e envie em gelo para manter a atividade.
• Não há dados de reatividade cruzada com outras espécies; para estudos não humanos, verifique a reatividade no seu sistema modelo.

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