Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Fosfo-CDK1-T14 para WB e ELISA - P06493

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da CDK1

• A CDK1, também conhecida como CDC2 ou proteína quinase p34, é uma serina/treonina proteína quinase que desempenha um papel fundamental no controle do ciclo celular eucariótico, modulando o ciclo do centrômero e promovendo a transição G2-M através da associação com múltiplas ciclinas de interfase.
  Referências relacionadas: PMID:16407259, PMID:16933150, PMID:17459720
• A CDK1 governa a entrada na mitose ao fosforilar uma ampla gama de substratos envolvidos na separação dos centrômeros, dinâmica do Golgi, quebra do envelope nuclear, condensação dos cromossomos e formação do fuso mitótico.
  Referências relacionadas: PMID:18480403, PMID:20360007, PMID:2188730
• A atividade da CDK1 é rigidamente regulada por fosforilação; a fosforilação inibitória em Thr14 (e Tyr15) pelas quinases WEE1 e PKMYT1 mantém a CDK1 inativa durante a interfase, enquanto a desfosforilação pelas fosfatases CDC25 desencadeia o início da mitose.
  Referências relacionadas: PMID:18480403, PMID:20360007
• A CDK1 se localiza em múltiplos compartimentos subcelulares, incluindo o núcleo, citoplasma, mitocôndrias, centrômero e fuso mitótico, refletindo suas diversas funções ao longo do ciclo celular.
• A CDK1 atua como receptor celular do vírus da hepatite C (HCV), facilitando a entrada viral nos hepatócitos.
• A CDK1 é uma fosfoproteína altamente modificada, sujeita à acetilação, ubiquitinação e fosforilação inibitória em Thr14 — um ponto de verificação crítico que controla a progressão mitótica.
• Especificidade tecidual: a CDK1 é encontrada notavelmente em tecidos de câncer de mama, destacando sua importância na pesquisa oncológica.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo fosforilado sintético ao redor de Thr14 da CDK1 humana, garantindo o reconhecimento específico do epítopo fosforilado. para WB, considere verificar a fosfo-especificidade tratando lisados celulares com fosfatase lambda e comparando a intensidade da banda.
• Este anticorpo foi validado para WB e ELISA. Para WB, um ponto de partida recomendado é testar uma variedade de concentrações de lisado e diluições de anticorpo; um controle de carga adequado deve ser incluído.
• A reatividade cruzada com humano, camundongo e rato permite aplicações em múltiplas espécies. Ao trabalhar com espécies diferentes, confirme a reatividade testando um lisado de controle positivo conhecido.
• Dado o papel da CDK1 na mitose, considere enriquecer as células mitóticas (por exemplo, por sincronização com nocodazol) para aumentar a detecção da forma fosforilada.

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