Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Fosfo-CDK2-T160 para WB, IHC-P, ELISA - P24941

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da CDK2

• A CDK2 (Quinase 2 Dependente de Ciclina) é uma serina/treonina-proteína quinase que desempenha um papel central na regulação do ciclo celular, particularmente na transição G1-S e na progressão da fase S. Ela fosforila substratos críticos como RB1, p53/TP53, NPM1 e BRCA2 para promover a síntese de DNA, duplicação do centrossomo e programas transcricionais. A CDK2 é essencial para a meiose, mas dispensável para a mitose. Referências relacionadas: PMID:10499802 PMID:10884347 PMID:10995386 PMID:11051553

• A atividade quinase da CDK2 é rigidamente controlada pela ligação da ciclina e fosforilação. Complexos Ciclina E/CDK2 impulsionam a transição G1-S, enquanto complexos Ciclina A/CDK2 impulsionam a progressão S-G2. A ativação completa requer fosforilação em Thr-160 dentro do loop-T pelo complexo da quinase ativadora de CDK (CAK). Referências relacionadas: PMID:18372919 PMID:19238148 PMID:19561645

• A CDK2 se localiza em múltiplos compartimentos subcelulares, incluindo o núcleo, centrossomo, corpúsculo de Cajal, citoplasma, citoesqueleto e endossomo, refletindo suas diversas funções na coordenação do ciclo celular, reparo de DNA e sinalização.

• A CDK2 participa na resposta e vias de reparo a danos no DNA. Ela fosforila a BRCA2 para regular o reparo por recombinação homóloga e fosforila a NBN para influenciar a manutenção dos telômeros, contribuindo assim para a estabilidade genômica. Referências relacionadas: PMID:15800615 PMID:20195506 PMID:21319273 PMID:28216226

• A CDK2 fosforila a histona metiltransferase EZH2, promovendo a manutenção das marcas epigenéticas H3K27me3 e o silenciamento gênico. Isso destaca o papel da CDK2 na regulação epigenética. Referências relacionadas: PMID:20935635

• Modificações pós-traducionais da CDK2, como fosforilação, acetilação e S-nitrosilação, modulam sua atividade e estabilidade. A CDK2 é membro da superfamília das proteínas quinases, apresentando domínios de ligação a ATP e a metais. Referências relacionadas: PMID:20079829

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo reconhece especificamente a CDK2 fosforilada em Thr-160. Para preservar a fosforilação durante o preparo da amostra, inclua inibidores de fosfatase nos tampões de lise e evite incubações prolongadas em temperatura ambiente.
• Para Western blotting, bandas são esperadas em aproximadamente 30 kDa e 34 kDa (correspondendo a isoformas da CDK2 ou deslocamentos induzidos por fosforilação). Use lisados tratados com λ‑fosfatase como controle negativo e extratos de células enriquecidas em fase S como controle positivo.
• Na imuno-histoquímica (IHC-P), os métodos de recuperação de antígeno devem ser otimizados para reter fosfo‑epítopos. Valide a especificidade da coloração comparando com a coloração de CDK2 total ou usando ensaios de competição com peptídeo.
• Para aplicações em ELISA, o anticorpo pode servir como reagente de captura ou detecção; titule cuidadosamente e confirme a linearidade para detecção quantitativa de Fosfo-CDK2-T160.

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