Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Fosfo-Chk1-S280 para WB, ELISA - O14757

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Chk1

• A serina/treonina-proteína quinase Chk1 (CHEK1), também conhecida como quinase do ponto de verificação-1, é um regulador chave dos pontos de verificação do ciclo celular e da resposta a danos no DNA (PubMed:11535615, PubMed:12399544, PubMed:12446774). Referências relacionadas: PMID:11535615, PMID:12399544, PMID:12446774
• Funciona fosforilando as fosfatases da família CDC25 (CDC25A, CDC25B, CDC25C) em resíduos de serina específicos, levando à sua inibição via ligação a 14-3-3 ou degradação proteassomal, impedindo assim a ativação da CDK e interrompendo a progressão do ciclo celular (PubMed:9278511, PubMed:12676583, PubMed:12676925, PubMed:12759351). Referências relacionadas: PMID:9278511, PMID:12676583, PMID:12676925, PMID:12759351
• Fosforila o TP53 em múltiplos sítios C-terminais, promovendo a acetilação e ativação do TP53, o que contribui para a parada do ciclo celular e apoptose (PubMed:10673501, PubMed:15659650, PubMed:16511572). Referências relacionadas: PMID:10673501, PMID:15659650, PMID:16511572
• Envolvida no reparo de DNA por recombinação homóloga através da fosforilação de RAD51 na Thr-309, facilitando o carregamento de RAD51 na cromatina, e regulando FANCE no reparo de ligações cruzadas (PubMed:15665856, PubMed:17296736). Referências relacionadas: PMID:15665856, PMID:17296736
• Localiza-se principalmente no núcleo e cromossomos, mas também é encontrada no citoplasma e nos centrossomos, refletindo seus múltiplos papéis na manutenção do genoma.
• Expressa de forma ubíqua, com níveis mais altos no timo, testículo, intestino delgado e cólon.
• Contém um domínio quinase de ligação a ATP e é regulada por fosforilação; classificada como serina/treonina-proteína quinases e envolvida em vias de dano e reparo de DNA.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio é um peptídeo fosforilado sintético em torno da S280 da Chk1 humana; confirme a especificidade do anticorpo por tratamento com fosfatase ou inibição competitiva com peptídeo não fosforilado.
• Este anticorpo monoclonal de coelho é validado para WB e ELISA; considere o uso de controles positivos apropriados (por exemplo, linhagens celulares humanas tratadas com agentes que danificam o DNA).
• Para WB, inclua inibidores de fosfatase no tampão de lise para preservar a fosforilação; valide no sistema de amostra relevante.
• O peso proteico previsto é de 54 kDa; otimize a porcentagem do gel e as condições de transferência de acordo.

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