Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Fosfo-Chk1-S296 para WB, ELISA - O14757

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CHK1

• O CHK1 (Checkpoint kinase-1) é uma serina/treonina proteína quinase codificada pelo gene CHEK1, existindo em múltiplas isoformas através de splicing alternativo.
• É essencial para a prisão do ciclo celular mediada por pontos de verificação e ativação do reparo do DNA em resposta a danos no DNA ou DNA não replicado, preservando assim a integridade genômica. Referências relacionadas: PMID:11535615, PMID:12399544, PMID:12446774
• O CHK1 fosforila as fosfatases da família CDC25 (CDC25A, B, C) levando à sua inibição e subsequente inativação do complexo CDK-ciclina, o que bloqueia a progressão do ciclo celular. Referências relacionadas: PMID:12676583, PMID:12676925, PMID:12759351, PMID:9278511
• Fosforila diretamente o TP53 em múltiplos sítios C-terminais, promovendo a ativação do TP53, prisão do ciclo celular e supressão da proliferação celular. Referências relacionadas: PMID:10673501, PMID:15659650, PMID:16511572
• O CHK1 modula o reparo por recombinação homóloga fosforilando o RAD51 em Thr-309, melhorando a associação do RAD51 à cromatina e o reparo do DNA. Referências relacionadas: PMID:15665856
• Substratos adicionais incluem FANCE (reparo de entrecruzamento), TLK1 (montagem da cromatina), SPRTN (recrutamento da cromatina), PABIR1/FAM122A (ponto de verificação G2/M) e histonas (regulação transcricional), destacando seu papel multifacetado na manutenção do genoma. Referências relacionadas: PMID:17296736, PMID:12660173, PMID:12955071, PMID:31316063, PMID:33108758, PMID:17380128
• Subcelularmente, o CHK1 localiza-se no núcleo, cromossomos, citoplasma e centrômero, consistente com suas diversas funções na sinalização de dano no DNA e controle do ciclo celular.
• O CHK1 é ubiquamente expresso, com os níveis mais altos no timo, testículo, intestino delgado e cólon, e sua atividade é estritamente regulada por fosforilação em múltiplos resíduos.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western Blot, inclua inibidores de fosfatases nos tampões de lise para manter a fosforilação e validar o tamanho da banda próximo a 54 kDa.
• Teste o anticorpo em lisados de células tratadas com agentes danificadores do DNA (por exemplo, etoposídeo, hidroxiureia) para confirmar a fosfo-especificidade em Ser296.
• Este anticorpo é validado para Chk1 humano; a reatividade cruzada com outras espécies deve ser avaliada individualmente.
• Para ELISA, considere revestir tanto peptídeos fosforilados quanto não fosforilados para demonstrar a fosfo-seletividade.

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