Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Phospho-Chk1-S345 para WB e ELISA - O14757

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Chk1

• A Chk1 é uma quinase de serina/treonina essencial para o checkpoint de dano ao DNA, necessária para a parada do ciclo celular e ativação do reparo do DNA em resposta a danos no DNA ou DNA não replicado. Referências relacionadas: PMID:11535615, PMID:12399544, PMID:12446774
• Ela reconhece o motivo consenso do substrato [R-X-X-S/T] e fosforila a CDC25A, CDC25B e CDC25C, levando à sua inibição via ligação a 14-3-3 e degradação proteassomal, bloqueando assim a atividade CDK-ciclina e interrompendo a progressão do ciclo celular. Referências relacionadas: PMID:9278511, PMID:12676583, PMID:12676925, PMID:12759351
• A Chk1 sofre fosforilação em vários resíduos, sendo a Ser-345 um sítio chave para sua ativação em resposta a danos no DNA, mediando sua atividade quinase e funções de checkpoint.
• A Chk1 fosforila a RAD51 na Thr-309 para promover o reparo por recombinação homóloga. Referências relacionadas: PMID:15665856
• Ela fosforila a TP53 em múltiplos sítios, aumentando sua estabilização e atividade transcricional para induzir a parada do ciclo celular. Referências relacionadas: PMID:10673501, PMID:15659650, PMID:16511572
• A Chk1 localiza-se no núcleo, cromossomos e centrossomos, refletindo seus papéis em processos associados à cromatina e regulação mitótica.
• É expressa de forma ubíqua, com os níveis mais altos no timo, testículo, intestino delgado e cólon.
• O splicing alternativo do gene CHEK1 produz uma isoforma repressora endógena que facilita a transição da fase S para G2/M.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno foi projetado usando um peptídeo fosforilado sintético correspondente ao resíduo de Ser-345 fosforilado da Chk1 humana. Isso garante especificidade para a forma ativada, fosforilada da quinase.
• Para Western blot, considere incluir inibidores de fosfatase durante o preparo da amostra para preservar o sinal de fosforilação. Valide a especificidade fosfo-tratando amostras com fosfatase lambda e observando a perda do sinal.
• O anticorpo foi testado para reatividade com amostras humanas, de camundongo e rato; a reatividade cruzada com outras espécies deve ser validada individualmente.
• No ELISA, o anticorpo pode ser adequado para detectar fosfo-Chk1 em lisados celulares ou ensaios baseados em peptídeos. Otimize as condições de revestimento e detecção para sua configuração específica.
• Dado o papel crítico da Chk1 na resposta a danos no DNA, este anticorpo é uma ferramenta útil para estudar a sinalização de checkpoint, regulação do ciclo celular e biologia do câncer.

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