Anticorpo Policloal de Coelho Anti-Fosfo-CRK/CRKII (Y221) para WB e ELISA - P46108

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da CRK

• A CRK é uma molécula adaptadora que funciona como proto-oncogene, transmitindo sinais de tirosina quinases para efetores a jusante através dos seus domínios SH2 e SH3.
• Desempenha um papel fundamental na adesão, espalhamento e migração celular ao mediar a sinalização BCAR1-CRK-RAPGEF1 e ativar o RAP1. Referências relacionadas: PMID:31311869
• A CRK está envolvida na formação de ondulações de membrana e na motilidade celular através de vias dependentes de Rac, além de regular a ativação de MAPK8 induzida por ligação celular.
• Ela participa da fagocitose de células apoptóticas e da motilidade celular ao interagir com DOCK1 e DOCK4. Referências relacionadas: PMID:19004829
• A CRK também pode regular a sinalização EFNA5-EPHA3, contribuindo para o desenvolvimento neuronal e a repulsão celular.
• A proteína se localiza principalmente no citoplasma e na membrana celular, o que é consistente com o seu papel na transdução de sinais em sítios de adesão.
• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação em resíduos de tirosina (como a Y221), acetilação e splicing alternativo, que modulam a sua atividade e interações.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um fosfopeptídeo sintético ao redor da Y221; certifique-se da fosfo-especificidade comparando os sinais em lisados de células estimuladas vs. não estimuladas ou usando tratamento com fosfatase.
• Para WB, considere usar um controle de carga (ex: anticorpo anti-CRK total) para normalizar os níveis de expressão proteica.
• Valide a reatividade do anticorpo no seu sistema de amostra específico (humano, camundongo ou rato), pois a reatividade cruzada pode variar de acordo com a conservação da sequência.
• Como o peso molecular previsto é de ~34 kDa, utilize marcadores de peso molecular adequados e verifique o tamanho da banda.
• Para ELISA, otimize as condições de revestimento e detecção com o peptídeo antígeno para confirmar a sensibilidade.

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