Anticorpo Monoclonal Anti-Fosfo-eIF2α-S51 para WB, ELISA - P05198

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da eIF2α

• A subunidade 1 do fator de iniciação da tradução eucariótica 2 (eIF2α) é um componente central do complexo heterotrimérico eIF2, também conhecido como eIF-2-alfa, eIF-2A ou eIF2-alfa. Junto com eIF2β e eIF2γ, ela organiza as etapas iniciais da síntese proteica dependente de capsídeo. Referências relacionadas: PMID:16289705
• Ela forma um complexo ternário com GTP e o metionil-tRNA iniciador, que então se associa à subunidade ribossomal 40S, facilitando o recrutamento do mRNA para formar o pré-complexo de iniciação 43S. A hidrólise subsequente do GTP e a liberação de eIF2-GDP permitem a formação do complexo 80S. Referências relacionadas: PMID:16289705
• A fosforilação na serina 51 (S51) por quinases ativadas por estresse (HRI, PKR, PERK, GCN2) converte eIF2α em um inibidor global da tradução, um evento central na resposta integrada ao estresse (ISR). Isso atenua a síntese geral de proteínas enquanto regula positivamente mRNAs seletivos, como ATF4 e QRICH1, permitindo a adaptação celular ao estresse. Referências relacionadas: PMID:19131336 PMID:33384352
• Além do controle da tradução, a eIF2α fosforilada promove a mitofagia independente de PRKN ao se realocar para a membrana externa mitocondrial após dano mitocondrial, fornecendo uma ligação direta entre a reprogramação traducional e o controle de qualidade organelar. Referências relacionadas: PMID:38340717
• A eIF2α é predominantemente citoplasmática e pode se concentrar em grânulos de estresse sob condições adversas. Ela também se localiza na superfície mitocondrial após a fosforilação induzida por estresse e foi detectada no citosol.
• Esta proteína está sujeita a múltiplas modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação e acetilação, que ajustam sua atividade, direcionamento subcelular e interações.
• Como uma proteína altamente conservada, a eIF2α é expressa em tecidos humanos, de camundongo e de rato, destacando seu papel essencial no controle traducional e no gerenciamento do estresse celular.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo fosforilado sintético que abrange a S51 da eIF2α humana (NP_004085.1); portanto, o anticorpo é projetado para reconhecer a forma fosforilada. A eIF2α não fosforilada pode não ser detectada.
• Para western blotting, inclua inibidores de fosfatase nos tampões de lise e incubação para preservar o sinal de fosforilação da S51. Verifique a especificidade do anticorpo tratando as amostras com λ-fosfatase ou fosfatase intestinal de bezerro antes da análise.
• Como a fosforilação da eIF2α é frequentemente rápida e transitória sob condições de estresse, otimize o tempo de preparação da amostra e os protocolos de indução de estresse (por exemplo, privação de soro, estresse do retículo endoplasmático ou privação de aminoácidos) no sistema celular ou tecidual relevante.
• Para aplicações de ELISA, considere usar um par de captura/detecção que diferencie eIF2α total e fosfo-eIF2α se a quantificação simultânea de ambas as formas for necessária; valide o ensaio com controles positivos e negativos apropriados.

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